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Title: Setting the proportion of CD4+ and CD8+ T-cells co-cultured with canine macrophages infected with Leishmania chagasi.
Authors: Viana, Kelvinson Fernandes
Soares, Rodrigo Dian Oliveira Aguiar
Ker, Henrique Gama
Resende, Lucilene Aparecida
Fagundes, Elaine Maria Souza
Dutra, Walderez Ornelas
Fujiwara, Ricardo Toshio
Lemos, Denise da Silveira
Sant'Ana, Rita de Cássia Oliveira
Wardini, Amanda Brito
Araújo, Márcio Sobreira Silva
Martins Filho, Olindo Assis
Reis, Alexandre Barbosa
Giunchetti, Rodolfo Cordeiro
Affilliation: Universidade Federal de Minas Gerais. Departamento de Morfologia. Laboratório de Biologia das Interações Celulares. Belo Horizonte, MG, Brasil/Universidade Federal do Tocantins. Departamento de Ciências Agrárias e Tecnológicas. Laboratório de Biomoléculas e Vacinas. Gurupi, TO, Brasil/Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brasil
Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brasil
Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brasil/Universidade Federal de Ouro Preto. Escola de Farmácia. Departamento de Análises Clínicas. Laboratório de Pesquisas Clínicas. Ouro Preto, MG, Brasil
Universidade Federal de Minas Gerais. Departamento de Morfologia. Laboratório de Biologia das Interações Celulares. Belo Horizonte, MG, Brasil/Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brasil
Universidade Federal de Minas Gerais. Departamento de Fisiologia e Biofisica. Laboratório de Biologia Celular e Molecular. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Federal de Minas Gerais. Departamento de Morfologia. Laboratório de Biologia das Interações Celulares. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Parasitologia. Laboratório de Imunologia e Genômica de Parasitos. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Federal de Minas Gerais. Departamento de Morfologia. Laboratório de Biologia das Interações Celulares. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Federal de Minas Gerais. Departamento de Morfologia. Laboratório de Biologia das Interações Celulares. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade Federal de Ouro Preto. Instituto de Ciências Exatas e Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brasil/ Universidade Federal de Ouro Preto. Escola de Farmácia. Departamento de Análises Clínicas. Laboratório de Pesquisas Clínicas. Ouro Preto, MG, Brasil
Universidade Federal de Minas Gerais. Departamento de Morfologia. Laboratório de Biologia das Interações Celulares. Belo Horizonte, MG, Brasil
Abstract: New methods for evaluating the canine immune system are necessary, not only to monitor immunological disorders, but also to provide insights for vaccine evaluations and therapeutic interventions, reducing the costs of assays using dog models, and provide a more rational way for analyzing the canine immune response. The present study intended to establish an in vitro toll to assess the parasitological/immunological status of dogs, applicable in pre-clinical trials of vaccinology, prognosis follow-up and therapeutics analysis of canine visceral leishmaniasis. We have evaluated the performance of co-culture systems of canine Leishmania chagasi–infected macrophages with different cell ratios of total lymphocytes or purified CD4+ and CD8+ T-cells. Peripheral blood mononuclear cells from uninfected dogs were used for the system set up. Employing the co-culture systems of L. chagasi–infected macrophages and purified CD4+ or CD8+ T-cell subsets we observed a microenvironment compatible with the expected status of the analyzed dogs. In this context, it was clearly demonstrated that, at this selected T-cell:target ratio, the adaptive immune response of uninfected dogs, composed by L. chagasi-unprimed T-cells was not able to perform the in vitro killing of L. chagasi–infected macrophages. Our data demonstrated that the co-culture system with T-cells from uninfected dogs at 1:5 and 1:2 ratio did not control the infection, yielding to patent in vitro parasitism (≥80%), low NO production (≤5 μM) and IL-10 modulated (IFN-γ/IL-10≤2) immunological profile in vitro. CD4+ or CD8+ T-cells at 1:5 or 1:2 ratio to L. chagasi–infected macrophages seems to be ideal for in vitro assays. This co-culture system may have great potential as a canine immunological analysis method, as well as in vaccine evaluations, prognosis follow-up and therapeutic interventions.
Keywords: Canine visceral leishmaniasis
Leishmania chagasi
In vitro co-culture
CD4+ and CD8+ t-cells
Issue Date: 2015
Publisher: Elsevier Science
Citation: VIANA, Kelvinson Fernandes et al. Setting the proportion of CD4+ and CD8+ T-cells co-cultured with canine macrophages infected with Leishmania chagasi. Veterinary Parasitology, vol. 211, n. 3-4, p. 124-132, 2015
DOI: 10.1016/j.vetpar.2015.05.025
ISSN: 0304-4017
Copyright: restricted access
Appears in Collections:MG - IRR - Artigos de Periódicos




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