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Title: Avaliação da resposta imune induzida por diferentes adjuvantes e sua aplicação no desenvolvimento de uma vacina de subunidade contra leptospirose
Advisor: Medeiros, Marco Alberto
Members of the board: Luca, Paula Mello de
Sato, Maria Notomi
Neves, Patrícia Cristina da Costa
Almeida, Renato Porrozzi de
McIntosh, Douglas
Authors: Dias, Patrícia Conceição Gonzalez
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil
Abstract: A leptospirose é uma enfermidade cosmopolita grave que acomete diferentes espécies de animais domésticos, silvestres e o homem. Sua ocorrência pode levar a elevados prejuízos econômicos na indústria pecuária e refletir significativamente na saúde pública. As vacinas convencionais contra a leptospirose humana e animal são baseadas na célula inteira inativada e possuem sucesso limitado, pois induzem imunidade de curta duração e proteção sorovar-específica. Um candidato com potencial para antígeno de vacinas de subunidades contra a leptospirose é a proteína rLigANI, que conferiu 90-100% de proteção contra o desafio letal em hamsters quando formulados com o Hidróxido de Alumínio (Al(OH)3), mas não foi capaz de induzir imunidade estéril. Na tentativa de aumentar a imunogenicidade da vacina baseada na proteína rLigANI, neste trabalho realizamos um estudo comparativo entre os adjuvantes Al(OH)3, Ca3(PO4)2 (nanoparticulas de Fosfato de Cálcio), Flagelina (proteína flagelar de Salmonella typhimurium) e ISCOM (baseado em saponina) com o intuito de avaliar e caracterizar a resposta imune induzida em camundongos pelos diferentes adjuvantes, através da avaliação da duração da resposta imune, do isotipo de imunoglobulina produzido e do perfil de citocinas associado Todos os adjuvantes foram capazes de induzir resposta significativa de anticorpos com alta avidez. O isotipo IgG1 foi o predominante em todas as formulações. No entanto, as formulações com os adjuvantes ISCOM e a combinação de Flagelina e Al(OH)3 revelaram um maior equilíbrio entre as subclasses IgG1, IgG2a, IgG2b e IgG3, sugerindo um possível balanço entre respostas Th1/Th2. ISCOM e Al(OH)3 se destacaram no desencadeamento de resposta imune de células T com estimulação significativa de células produtoras de IFN- \0264, IL-2, e IL-17. O adjuvante ISCOM se destacou entre os demais, induzindo maiores títulos de anticorpos com a menor dose vacinal, além de perfil balanceado de subclasses e estimulação de citocinas superior ao adjuvante Al(OH)3, nosso adjuvante controle neste estudo, sendo assim o adjuvante escolhido para ser utilizado em desafio em hamsters. Este estudo forneceu informações importantes para entender a resposta imune induzida por cada adjuvante quando associado com a proteína rLigANI, que poderão ser utilizadas futuramente, auxiliando no desenvolvimento de vacinas contra leptospirose
Abstract: Leptospirosis is a serious cosmopolitan disease that affects different species of domestic animals, wildlife and humans. Its occurrence can lead to high economic losses in livestock industry and reflect significantly on public health. Conventional vaccines against human and animal leptospirosis are based on inactivated whole cell and have limited success because induce short and serovar-specific protection immunity. A potential candidate antigen to compose a subunit vaccines against leptospirosis is the rLigANI protein, which conferred 90-100% protection against lethal challenge in hamsters when formulated with Al(OH)3, but was not able to induce sterile immunity. In an attempt to optimize the immunogenicity of the vaccine based on rLigNI protein, in this work we conducted a comparative study between the adjuvants Al(OH)3, Ca3(PO4)2 (calcium phosphate nanoparticles), Flagellin (flagellar protein of Salmonella typhimurium), and ISCOMs (based saponin). We evaluated and characterized the immune response induced by different adjuvants in mice by evaluating the duration of immune response, the immunoglobulin G subclass produced after immunization ans well as the associated cytokine profiles All adjuvants were able to induce significant high avidity antibody responses. The IgG1 subclass was prevalent in all formulations. However, formulations with ISCOMs adjuvant and the combination of Flagellin and Al(OH)3 showed a better balance between IgG1, IgG2a, IgG2b and IgG3 subclasses, suggesting a possible balance between Th1 / Th2 responses. ISCOMs and Al(OH)3 are highlighted in triggering an immune response of T cells with significant stimulation of cells producing IFN- \0264, IL-2 and IL-17. The ISCOM adjuvant stood out among the others, inducing higher antibody titers with the lowest concentration of rLigANI protein. ISCOM Adjuvant induced a balanced profile of IgG subclasses and cytokine production superior than our control adjuvant Al(OH)3 and for that reason was chosen for use in challenge experiments with hamsters. This study provided important information for understanding the immune response induced by each adjuvant when combined with rLigANI protein that may be used to assisting in the development of vaccines against leptospirosis
DeCS: Adjuvantes Imunológicos
Leptospirose/imunologia
Proteínas Recombinantes
Vacina
Hidróxido de Alumínio
Issue Date: 2016
Citation: DIAS, P. C. G. Avaliação da resposta imune induzida por diferentes adjuvantes e sua aplicação no desenvolvimento de uma vacina de subunidade contra leptospirose. 2016. 87f. Dissertação (Mestrado em Biologia Celular e Molecular) - Fundação Oswaldo Cruz, Instituto Oswaldo Cruz, Rio de janeiro, RJ, 2016
Date of defense: 2016-09-05
Place of defense: Rio de Janeiro/RJ
Department: Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz
Program: Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular
Copyright: open access
Appears in Collections:IOC - PGBCM - Dissertações de Mestrado

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