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Title: Development of standard methods for Zika virus propagation, titration, and purification
Authors: Coelho, Sharton Vinicius Antunes
Neris, Rômulo Leão Silva
Papa, Michelle Premazzi
Schnellrath, Laila Castro
Meuren, Lana Monteiro
Tschoeke, Diogo A.
Leomil, Luciana
Verçoza, Brunno Renato Farias
Miranda, Milene
Thompson, Fabiano L.
Da Poian, Andrea Thompson
Souza, Thiago Moreno L.
Carneiro, Fabiana Avila
Damaso, Clarissa R.
Miranda, Iranaia Assunção
Arruda, Luciana Barros de
Affilliation: Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes. Departamento de Virologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes. Departamento de Virologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes. Departamento de Virologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Biofisica Carlos Chagas Filho. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes. Departamento de Virologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Biologia. Departamento de Genética. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Biologia. Departamento de Genética. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Polo Avançado de Xerém. NUMPEX – Núcleo Multidisciplinar de Pesquisas. Duque de Caxias, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunofarmacologia. Rio de Janeiro, RJ. Brasil .
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Biologia. Departamento de Genética. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Bioquímica Médica Leopoldo de Meis. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunofarmacologia. Rio de Janeiro, RJ. Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia de Gestão da Inovação em Doenças Negligenciadas. Centro de Desenvolvimento Tecnológico em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Polo Avançado de Xerém. NUMPEX – Núcleo Multidisciplinar de Pesquisas. Duque de Caxias, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Biofisica Carlos Chagas Filho. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes. Departamento de Virologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Instituto de Microbiologia Paulo de Góes. Departamento de Virologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract: The emergence of Zika virus (ZIKV) infection has stimulated several research groups to study and collaborate to understand virus biology and pathogenesis. These efforts may assist with the development of antiviral drugs, vaccines and diagnostic tests, as well as to promote advancements in public health policies. Here, we aim to develop standard protocols for propagation, titration, and purification of ZIKV strains, by systematically testing different cell types, kinetics, multiplicity of infection and centrifugation protocols. ZIKV produces a productive infection in human, non-human primate, and rodents-derived cell lines, with different efficacies. The highest yield of ZIKV-AFR and ZIKV-BR infectious progeny was obtained at 7days post infection in C6/36 cells (7×10(7) and 2×10(8) PFU/ml, respectively). However, high titers of ZIKV-AFR could be obtained at earlier time points in Vero cells (2.5×10(7)PFU/ml at 72hpi), whereas ZIKV-BR titers reached 10(8) PFU/ml at 4dpi in C6/36 cells. High yield of purified virus was obtained by purification through a discontinuous sucrose gradient. This optimized procedure will certainly contribute to future studies of virus structure and vaccine development. Beyond the achievement of efficient virus propagation, the normalization of these protocols will also allow different laboratories around the world to better compare and discuss data regarding different features of ZIKV biology and disease, contributing to more efficient collaborations and progression in ZIKV research.
Keywords: Zika virus
Virus propagation
Virus purification
Standard protocols
keywords: Zika virus
Propagação de vírus
Purificação de vírus
Protocolos padrão
Issue Date: 2017
Publisher: Elsevier
Citation: COELHO, Sharton Vinicius Antunes et al. Development of standard methods for Zika virus propagation, titration, and purification. Journal of Virological Methods, v.246, p.65-74, Apr. 2017.
DOI: 10.1016/j.jviromet.2017.04.011
ISSN: 0166-0934
Copyright: restricted access
Appears in Collections:CDTS - Artigos de Periódicos
IOC - Artigos de Periódicos

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