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Title: Perfil proteolítico de extratos aquosos de folha e semente de Mucuna pruriens (L.) DC
Other Titles: Proteolytic profile of aqueous leaf and seed extracts from Mucuna pruriens (L.) DC
Authors: Silva-López, Raquel Elisa
Vidal, Nathalia N. M.
Gonçalves, Rayane N.
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos. Departamento de Química de Produtos Naturais. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos. Departamento de Química de Produtos Naturais. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos. Departamento de Química de Produtos Naturais. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract: Mucuna pruriens (L.) DC é uma planta medicinal, da família Fabaceae, usada no tratamento de diversas doenças. Extratos aquosos de folhas e sementes de M. pruriens foram preparados utilizando água, detergente Triton X-100 e tampões fosfato de sódio e Tris-HCl. Os extratos de folha exibiram os maiores teores de proteínas. Todos os extratos exibiram atividade sobre o substrato N-α-p-tosil-L-arginil-metil éster (L-TAME), principalmente nas faixas de pH ácido (4,0-5,0) e alcalino (9,0- 9,5), e atividade máxima nas temperaturas entre 40-60ºC, com exceção do extrato de semente obtido com tampão Tris-HCl (MP-ST), que apresentou pico em 80ºC. Os extratos de folhas exibiram perfis eletroforéticos semelhantes sob condições redutoras e não redutoras, sendo observada uma proteína majoritária com de cerca de 30 kDa. Na análise capacidade proteolítica, o zimograma apresentou um perfil distinto em diferentes valores de pH: em pH 9,0 os extratos obtidos com água (MP-EA) e com detergente (MP-ED) apresentaram atividade na região próxima de 170 kDa; em pH 9,5 pôde-se observar duas regiões de proteólise entre 66-90 e 200-250 kDa, com exceção do MP-EA. Os extratos de semente apresentaram perfis distintos em condições redutoras e não redutoras, com proteínas majoritárias entre 35 e 23 kDa, e atividade lítica sobre a gelatina na região de 80 kDa. Todos os extratos apresentaram atividade proteolítica contra os substratos proteicos hemoglobina, caseína e albumina e boa estabilidade na presença de agentes surfactantes e oxidantes. As proteases presentes nos extratos de M. pruriens sugerem ser da classe das serino e metaloproteases, com atividade modulada positivamente na presença íons Mn2+ e Ca2+. Essas características bioquímicas conferem aos extratos de M. Pruriens grande valor biotecnológico e possível potencial terapêutico.
Abstract: Mucuna pruriens is a medicinal plant, from Fabaceae family, used in the treatment of various diseases. Aqueous extracts from M. pruriens leaf and seed were prepared using water (MP-EA), detergent Triton X-100 (MP-ED), sodium phosphate and Tris-HCl buffers and leaf extracts presented the highest protein content. All extracts exhibited expressive activity against L-TAME in acid (4.0-5.0) and alkaline pH (9.0- 9.5) range and in temperatures about 40-60ºC, with exception of the seed extract prepared in Tris-HCl with maximal activity at 80ºC, besides all extracts preserved good stability in high temperatures. Leaf extracts showed similar electroforetical profiles under reducing and non-reducing conditions with a major protein of about 30 kDa. On the other hand, seed extracts presented distinctive protein profiles under reducing and non-reducing conditions, with major proteins between 35 and 23 kDa and the gelatinolytic activity in the region of 80 kDa. Leaf extracts showed distinct protease activity on gelatin in different pH values. Only MPEA e MP-ED presented gelatinolytic activity at pH 9,0 in the region about 170 kDa, on the other hand, at pH 9,5 was observed the protease activity on gelatin in two regions about 66-90 and 200-250 kDa, with the exception of MP-EA. All extracts hydrolyzed hemoglobin, casein and albumin and had good stability in the presence of surfactants and oxidizing agents. Proteases of Mucuna pruriens extracts belong to serine and metalloprotease classes, positively modulated by ions. They have biochemical features which gives them high biotechnological value and possible therapeutic potential.
Keywords: Mucuna Pruriens
Proteases
Enzymatic Activity
Stability
keywords: Mucuna pruriens
Proteases
Atividade Enzimática
Estabilidade
Issue Date: 2017
Publisher: Fundação Oswaldo Cruz. Farmanguinhos. Núcleo de Gestão em Biodiversidade e Saúde.
Citation: SILVA-LÓPEZ, Raquel Elisa et al. Perfil proteolítico de extratos aquosos de folha e semente de Mucuna pruriens (L.) DC. Revista Fitos, [S.l.], v. 10, n. 4, p. 486-504, maio 2017.
DOI: 10.5935/2446-4775.20160035
ISSN: 2446-4812
Copyright: open access
Appears in Collections:Farmanguinhos - Artigos de Periódicos
Farmanguinhos - Revista Fitos - Volume 10 - Número 4

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