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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/19763
AVALIAÇÃO DO POTENCIAL TERAPÊUTICO DE NOVOS DERIVADOS TETRAZÓLICOS NO MODELO DE LEISHMANIOSE CUTÂNEA EXPERIMENTAL
Faiões, Viviane dos Santos | Date Issued:
2013
Author
Advisor
Comittee Member
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil
Abstract in Portuguese
As leishmanioses são causadas por protozoários parasitos do gênero Leishmania, e estas vão desde infecções cutâneas, mucocutâneas até a forma visceral, constituindo um sério problema de saúde pública. Os fármacos utilizados na clínica são tóxicos e muitas vezes ineficientes. Desta forma, uma busca racional por novas alternativas terapêuticas torna-se necessária. Em nosso estudo foi investigada a atividade anti-Leishmania amazonensis (MHOM/BR/77/LTB0016) de nove derivados tetrazólicos sintéticos. Entre todos os derivados, o composto 5-[5-amino-1-(4\2019-metoxifenil)-1H-pirazol-4-il]-1H-tetrazol (MSN20) mostrou atividade sobre promastigotas (IC50 de 37,1 \03BCM) e amastigotas intracelulares (IC50 de 22,3 \03BCM) e baixa toxicidade sobre macrófagos peritoneais murinos (LD50 = 210,6 \03BCM). A quantificação de nitrito no sobrenadante de macrófagos infectados e tratados com MSN20 sugeriu uma redução na produção de NO, embora não estatisticamente significativa. Em contrapartida, o tratamento de macrófagos não infectados e estimulados com LPS (5\03BCg/mL) e IFN-\0263 (1ng/mL) levou a uma redução concentração-dependente da produção de nitrito
No modelo murino de leishmaniose cutânea a MSN20 foi capaz de reduzir o tamanho das lesões e reduzir a carga parasitária significativamente quando administrada por via oral. A avaliação de marcadores sorológicos foi realizada ao término do tratamento sistêmico, indicando ausência de danos hepático e renal. Como os azóis antifúngicos são inibidores conhecidos da biossíntese do ergosterol e muitos ainda induzem estresse oxidativo, a composição esteroídica e o metabolismo oxidativo de promastigotas tratadas com MSN20 foram avaliados. A análise por cromatografia em camada fina não apontou alterações no perfil de esteróis, mesmo em concentrações acima da IC50. O tratamento com MSN20 não levou a produção de espécies reativas de oxigênio (ERO), nem a redução do potencial de membrana mitocondrial (\0394\0470m) de promastigotas de L. amazonensis. Desta forma, a MSN20 se apresentou como um novo protótipo tetrazólico, ativo por via oral na leishmaniose cutânea murina, com mecanismo de ação distinto dos demais azóis, que permanece a ser elucidado
Abstract
Leishmaniasis is
caused by protozoan
parasites
of the genus
Leishmania
,
and these
range from
skin infections
,
mucocutaneous
to
visceral form
, constituting a serious
public health problem
.
The drugs u
sed
in the clinic
are toxic
and often
ineffective
.
Thus,
a
rational search
for new
therapeutic alternatives
becomes necessary
.
In this study
we
investigated
the anti
-
Leishmania
amazonensis
(
MHOM/BR/77/LTB0016)
activity
of
nine
synthetic
tetrazoles
derivati
ves
.
Among
all derivatives
, the compound
5
-
[
5
-
amino
-
1
-
(4'
-
methoxyphenyl)
-
1
H
-
pyrazol
-
4
-
yl]
-
1
H
-
tetrazole (
MSN20) showed
activity
against
promastigotes
(
IC
50
of
3
7
.
1
μM
) and
intracellular amastigotes
(
IC
50
of
22.3
μM
)
and low toxicity
to
murine peritoneal
m
acrophages
(
LD
50
=
210.6
μM)
.
Quantification
of nitrite
in the supernatants
of
infected
macrophages
treated with
MSN20
sug
g
ested a
reduction in NO production, although not statistically significative
.
In contrast,
non
-
infected
macrophages
stimulated with
L
PS (
5μg/mL) and
IFN
-
ɣ
(
1ng/mL)
led to a
concentratio
n
-
dependent reduction of nitrite production.
In murine model of cutaneous
leishmaniasis the MSN20 was able to reduce
both
the size of the lesions and the parasite
burden significantly when administered orally
. Evaluation of serological markers was
performed
at the end of systemic treatment
indicating
absence of liver
and kidney
damage.
As the
azole
antifungal agents are
known inhibitors
of the biosynthesis
of
ergosterol
,
and many
of them also
induce oxidative
stress
, the sterol composition and
the oxidative metabolism of MSN20
-
treated promastigotes were evaluated
.
Analysis by
thin layer chromatography
showed no
change
in the
sterol
profile
, even at
concentrations
above the
IC
50
. MSN20
treatment
did not
induce
t
o
production of
reactive oxygen species
(
ROS)
or
reduction in
mitochondrial membrane potential
(
ΔѰm)
of
promastigotes
.
Thus, MSN20 is a new tetrazole prototype, orally active in
murine leishmaniasis, with a distinct mechanism of action from other azoles th
at
remains to be elucidated.
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