Influência genética durante a infecção por dengue: polimorfismos de base única associados à dengue grave e seus efeitos funcionais

Abstract

De acordo com a organização Mundial da Saúde (OMS) a dengue é um dos principais problemas de saúde pública no Brasil e outras regiões tropicais ao redor do mundo. Podendo ser transmitida por quatro diferentes sorotipos virais, a dengue pode se manifestar de forma assintomática, branda ou através de formas graves. Por ser uma doença multifatorial, diferenças genéticas entre os pacientes podem ser um dos principais fatores que contribuem para a gravidade da doença. O objetivo deste trabalho foi estudar essas diferenças utilizando metodologias epidemiológicas e análises funcionais usando a abordagem de genes candidatos. Dentre os SNPs estudados, o rs1285933 no gene CLEC5A foi associado ao risco de dengue grave em duas independentes populações de estudo provenientes das cidades do Rio de Janeiro e Recife (OR=2,25: p=0,03 e OR =2.64; p=0,01, respectivamente). Além disso, o SNP rs4804803 no gene do receptor DC-SIGN também foi associado ao desfecho de dengue em ambas as populações (OR=0,12 :p=0,04 e OR=2,01:p=0,04). Devido ao resultado genético encontrado, nós buscamos estudar a participação do gene CLEC5A na infecção por dengue e o efeito do SNP rs1285933 (C/T) na sua expressão. Nós encontramos o receptor CLEC5A mais expresso na superfície de monócitos infectados por dengue comparado aos monócitos não infectados (p<0,05) e correlacionado à produção de TNF nos sobrenadantes após 48 horas de infecção (Spearman=0,72; p=0,03). Monócitos de indivíduos TT para o SNP rs1285933 apresentaram uma menor expressão de CLEC5A em sua superfície comparado aos indivíduos CC (p<0,05) e não foram correlacionados com a produção de TNF. Em amostras de pacientes com dengue branda infectados com DENV4, a expressão RNA mensageiro de CLEC5A também foi correlacionada com a expressão de TNF (Spearman=0,65; p=0,0001) e vários outros mediadores. Devido aos resultados controversos para o SNP rs4804803 no gene DC-SIGN, nós realizamos uma meta-análise com subsequente atualização a fim de obter uma OR consenso. Os resultados mostraram que o SNP não está associado ao desfecho da dengue quando todos os estudos são combinados (ORalelo = 1.36; p = 0.13; ORgenotipo = 0.58; p = 0.19; ORcarreador = 1.51; p = 0.06). Entretanto, a OR consenso para estudos asiáticos mostrou uma associação de risco (ORcarreadores = 2.50; p = 0.02) indicando que diferenças étnicas entre essas populações podem ser responsáveis pelas discrepâncias observadas. Os resultados encontrados confirmam a importância dos genes CLEC5A e DC-SIGN na imunopatogênese da dengue assim como o envolvimento do SNP rs1285933 nas vias de sinalização desencadeadas após a interação do vírus da dengue com o receptor CLEC5A. Outra abordagem que utilizamos foi estudar o perfil de expressão gênica em pacientes com dengue e outras infecções febris (OIF) dentre elas chikungunya, a fim de encontrar biomarcadores precoces de gravidade. Genes como ALOX5AP, SOD2, IL23 e BCL2 se destacaram como marcadores e sugerem um papel importante dessas vias na imunopatogênese diferencial de arboviroses. Tais genes podem servir como ponto de partida para estudos funcionais mais específicos.