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Title: Avaliação do potencial diagnóstico de novos antígenos de Leishmania infantum em pacientes coinfectados HIV/LV no estado de Pernambuco
Other Titles: Potential assessment of novel Leishmania infantum antigens in co-infected pacients HIV/VL in Pernambuco
Advisor: Medeiros, Zulma Maria de
Members of the board: Medeiros, Zulma Maria de
Vasconcelos, Luydson Richardson Silva
Viana, Isabelle Freire Tabosa
Authors: Ramos, Rhaíssa Evelyn Moraes
Coadvisor: Reis, Christian Robson de Souza
Magalhães, Franklin Barbalho
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil.
Abstract: A associação das infecções causadas pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) e pelo protozoário Leishmania spp. caracteriza a coinfecção Leishmania/HIV-aids, que vem sendo registrada há cerca de duas décadas. A coinfecção LV/HIV-aids emerge como uma doença grave, cujos patógenos podem agir sinergicamente estabelecendo uma infecção de elevado fator de risco quando não diagnosticada ou não tratada, devido à imunossupressão causada por ambas às doenças. A coexistência do HIV e da Leishmania na mesma célula modula essas respostas causando um efeito protetor ou de progressão da doença. Com a finalidade de agilizar o tratamento, reduzindo a mortalidade e morbidade, testes diagnósticos são empregados no diagnóstico da coinfecção. O Ministério da Saúde recomenda a associação dos testes sorológicos, moleculares e exame parasitológico para a definição de coinfecção. Apesar de resultados promissores nos testes diagnósticos, ainda não há um teste sorológico capaz de detectar satisfatoriamente a condição de coinfecção. Estudos acerca dos componentes antigênicos do parasito e do vírus tornam-se essenciais para a compreensão da resposta imune do hospedeiro. Este estudo objetivou avaliar a capacidade de reconhecimento sorológico de cinco proteínas recombinantes de Leishmania infantum em pacientes coinfectados LV/HIV-aids através do método de ELISA indireto. As amostras foram oriundas de biorrepositórios. Os plasmídeos utilizados foram obtidos em trabalhos prévios de colaboradores. Os antígenos foram expressos através de transformação bacteriana em E. coli e purificadas por cromatografia de afinidade utilizando resina comercial de níquel. A avaliação dos antígenos foi realizada através dos testes de Aglutinação Direta (DAT) e do Ensaio Imunoenzimático (ELISA). Dentre os antígenos, os melhores resultados para o diagnóstico da coinfecção LV/HIV-aids com exame parasitológico confirmatório foram os polipeptídeos Lci1, Lci2, Lci10, Lci12 e Lci13, com elevadas sensibilidade e especificidade. Em relação ao grupo sem o exame parasitológico, nenhuma proteína se destacou. Concluiu-se que a K39 comercial se apresentou como a melhor proteína, com sensibilidade e especificidade acima de 80%.
Abstract: The association between the infections caused by the human imunodeficiency virus (HIV) and by the Leishmania spp. protozoan defines the coinfection Leishmania/HIV-aids, that has been reported around two decades. The co-infection VL/HIV-aids emerges as a very serious process ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DE SAÚDEse pathogens can act synergistically leading to an infection of highly risk factor when undiagnosed or untreated, due to immunosuppression caused by both diseases. The coexistence of HIV and Leishmania in the same cell modulates cellular responses being able to cause protector effect or disease progression. In order to expedite treatment, reducing mortality and morbidity, diagnostic tests are used for the diagnosis of coinfection. The Brazilian Ministry of Health recommends the association of serologic tests, molecular tests and direct search of the parasite for the definition of coinfection. Despite promising results concerning the tests, there is still no serological test that can satisfactorily detect the status of coinfection. Studies on the antigenic components of the parasite as well as the virus become essential for understanding the immune response of the host. The goal was to evaluate the serologic recognition capabilities of five recombinant proteins of Leishmania infantum in coinfected patients VL/HIV based on the indirect ELISA. Samples were derived from a previous biorepository. The utilized plamids were obteined from previous works. Antigens were expressed by bacterial transformation in E. coli and purified by affinity chromatography using commercial nickel resin. The evaluation was conducted through the Direct Agglutination Test (DAT) and the Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Among the antigens, the best for the diagnosis of LV/HIV-aids co-infection with confirmatory parasitology were the polypeptides Lci1, Lci2, Lci10, Lci12 and Lci13, which demonstrated highly sensitivity and specificity. For the group without the confirmatory parasitology test, none of the proteins were good. It was concluded that the commercial K39 presented as the best protein, with sensitivity and specificity above 80%.
Keywords: Visceral Leishmaniasis
Leishmania infantum
HIV
AIDS
Coinfection
keywords: Leishmaniose visceral
Leishmania infantum
HIV
AIDS
Coinfecção
DeCS: Leishmaniose visceral
complicaçöes
Leishmaniose visceral
diagnóstico
Infecções por HIV
Complicações
Leishmania infantum
HIV
Síndrome de Imunodeficiência Adquirida
Complicações
Coinfecção
Antígenos de protozoários
Proteínas Recombinantes
imunologia
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática
métodos
Sensibilidade e Especificidade
Estudos de Avaliação
Issue Date: 2017
Citation: RAMOS, Rhaíssa Evelyn Moraes. Avaliação do potencial diagnóstico de novos antígenos de Leishmania infantum em pacientes coinfectados HIV/LV no estado de Pernambuco. 2017. Dissertação (Mestrado em Biociências e Biotecnologia em Saúde) – Instituto Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2017.
Date of defense: 2017-04-27
Place of defense: Recife/PE
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães.
Program: Programa de Pós-Graduação em Biociências e Biotecnologia em Saúde
Copyright: restricted access
Appears in Collections:PE - IAM - PPBBS - Dissertações de Mestrado

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