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Title: Estudo da migração celular induzida por Leishmania braziliensis na composição da reação inflamatória mimetizada em modelo de bolsa de ar subcutânea em hamster e a sua relação com a evolução e gravidade da infecção
Advisor: Cruz, Alda Maria da
Teixeira, Maria Jania
Authors: Vasconcelos, Camila Oliveira de
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract: Leishmania (Viannia) braziliensis é a principal espécie envolvida na leishmaniose tegumentar americana. O hamster é o modelo mais susceptível às espécies do subgênero Viannia. O surgimento das lesões está relacionado à carga infectiva inicial, influenciando a gravidade, a evolução clínica e as alterações histopatológicas na doença. Neste estudo, foi avaliado o perfil imunocelular inflamatório induzido por diferentes cargas infectivas de L. braziliensis e a sua relação com a evolução e gravidade da infecção, em modelo hamster. Hamsters (n=60) foram infectados na pata (via intradérmica) com promastigotas de L. braziliensis com 104, 105 e 106 e a mensuração da espessura da pata foi realizada semanalmente por 45 dias. No 15º e 45º dia pós-infecção, os animais foram submetidos à bolsa de ar subcutânea com inóculo de 106 parasitos. Foram coletados a pata infectada e o linfonodo de drenagem da lesão (LN), bem como o exsudato e o tecido da bolsa de ar, para avaliação de parâmetros, tais como: recrutamento e fenótipo celular (bolsa de ar), carga parasitária (pata e LN; RTqPCR), expressão de citocinas (pata e LN; RTqPCR) e aspectos histopatológicos (pata e tecido da bolsa de ar) Observou-se que o tempo de surgimento das lesões foi inversamente relacionado à concentração do inóculo, enquanto os aspectos das lesões, carga parasitária e alterações histopatológicas foram diretamente relacionados à concentração do inóculo. Observou-se ainda um perfil misto de expressão de citocinas, nos 3 inóculos e nos tempos avaliados. Observou-se também baixa modulação de IL-4 e TGF-\03B2 nos animais infectados com 104, o que pode ter contribuido para a discreta carga parasitária e lesões mais benignas, ao contrário do que foi observado com 106. Nos inóculos 105 e 106 observou-se uma aparente desregulação da resposta imunológica, com alta expressão de citocinas, provavelmente relacionado ao maior estímulo antigênico. Em suma, os resultados mostraram uma tendência do inóculo 104 induzir um controle mais eficiente da infecção, mediado provavelmente pela baixa modulação das citocinas IL-4, IL-10 e TGF-\03B2. Ao contrário, o inóculo 106 mostrou tendência a um controle menos efetivo, e mesmo mediante a alta expressão de IFN-\0263 e iNOS, induziu também IL-4 e TGF-\03B2, o que pode contribuir para o curso crônico da doença. Além disso, os dados sugerem também que o perfil de citocinas produzidas na primo-infecção no linfonodo pode ter influenciado o tipo e quantidade de células que foram recrutados no tecido da bolsa de ar.
Abstract: Leishmania (Viannia) braziliensis is the main species involved in American tegumentary leishmaniasis. Hamster is the most susceptible model to the species of the subgenus Viannia. The appearance of the lesions is related to the initial infectious load, influencing the severity, the clinical evolution and the histopathological changes in the disease. In this study, the inflammatory immunocellular profile induced by different infective loads of L. braziliensis and its relation with the evolution and severity of the infection was evaluated in a hamster model. Hamsters (n = 60) were infected in the footpad (intradermal way) with L. braziliensis promastigotes with 104, 105 and 106 and the footpad thickness measurement was performed weekly for 45 days. On the 15th and 45th day after infection, the animals were submitted to a subcutaneous air pouch with inoculum of 106 parasites. The infected footpad and lesion drainage lymph node (LN), as well as the exudate and the air pouch tissue, were collected for evaluation of parameters such as: recruitment and cell phenotype (air pouch), parasitic load (footpad and LN, RTqPCR), cytokine expression (footpad and LN; RTqPCR) and histopathological aspects (footpad and tissue of the air pouch) It was observed that lesion appearance was inversely related to the concentration of the inoculum; while lesion aspects, parasite load and histopathological changes were directly related to the concentration of the inoculum. A mixed profile of cytokine expression was also observed in the 3 inocula and in the evaluated times. Low modulation of IL-4 and TGF-\03B2 was also observed in the animals infected with 104, which may have contributed to the mild parasite load and more benign lesions, contrary to what was observed with 106. In the inocula 105 and 106 was observed an apparent deregulation of the immune response, with high expression of cytokines, probably related to the major antigenic stimulus. In summary, the results showed a tendency of the inoculum 104 to induce a more efficient infection control, probably mediated by the low modulation of IL-4, IL-10 and TGF-\03B2 cytokines. In contrast, the inoculum 106 showed a trend towards a less effective control, and even through the high expression of IFN-\0263 and iNOS, it also induced IL-4 and TGF-\03B2, which may contribute to the chronic course of the disease. In addition, the data also suggest that the cytokine profile produced in the lymph node primo-infection may have influenced the type and the amount of cells that were recruited into air pouch tissue.
keywords: Leishimania Braziliensis
Citocinas
Cricetinae
Movimento Celular
Issue Date: 2017
Citation: VASCONCELOS, Camila Oliveira de. Estudo da migração celular induzida por Leishmania braziliensis na composição da reação inflamatória mimetizada em modelo de bolsa de ar subcutânea em hamster e a sua relação com a evolução e gravidade da infecção. 2017. 75 f. Tese (Doutorado em Medicina Tropical)-Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Fortaleza, 2017.
Date of defense: 2017
Place of defense: Fortaleza
Department: Instituto Oswaldo Cruz
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz
Program: Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropical
Copyright: open access
Appears in Collections:IOC - PGMT - Teses de Doutorado

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