Avaliação in vitro da ação do benzonidazol sobre células aderentes de portadores crônicos da doença de Chagas submetidas à interação com o Trypanosoma Cruzi

Abstract

O benefício do Benzonidazol (Bz) aos portadores crônicos da doença de Chagas (DC) ainda demonstra controvérsias, mas seu uso pode ter a finalidade de prevenir/retardar a evolução da doença para as formas mais graves. Um dos principais fatores que pode influenciar na eficácia do tratamento é a possível cooperação entre os efeitos da droga e a resposta imunológica do hospedeiro. Nesse contexto, avaliamos a resposta imune de células aderentes obtidas de células mononucleares de sanue periférico (PBMC) (de pacientes portadores da DC) submetidas ao tratamento com Bz após a infecção com T. cruzi. Amostras de sangue de portadores crônicos da DC (n = 7) e de indivíduos não infectados (n = 6) foram coletados para obtenção de PBMCs. As células foram cultivadas com T. cruzi, seguido de adição do Bz. Após o tempo de cultivo, os sobrenadantes foram coletados e armazenados, e as células foram avaliadas por citometria de fluxo, quanto à expressão de moléculas de superfície. Avaliamos também a produção de Óxido Nítrico (NO), a capacidade fagocítica, o índice de sobrevivência intracelular do parasita e por fim a morte celular. Os resultados mostraram que o Bz induz a regulação positiva de moléculas de ativação (CD80), de apresentação de antígenos (HLA-DR), e de fagocitose (CD64, CD35) e a morte celular das PBMCs pelo processo de necrose. Entretanto, não influencia na resposta inflamatória, nem na produção de NO, bem como, sobre a capacidade fagocítica e sobre o índice de sobrevivência intracelular dos parasitas. A presença do T. cruzi modulou negativamente a expressão de moléculas fagocíticas e inflamatórias (CD16a, CD11b e CD32) e positivamente a molécula fagocítica e de ativação CD64. Também induziu a produção de NO, pelas células aderentes. Os resultados apontam para a relevância do uso do Bz, por apresentar um conjunto de interações fármaco/resposta imune importantes para o equilíbrio imunológico frente ao T. cruzi, bem como por ser também um importante tripanocida.