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AVALIAÇÃO CLÍNICA E LABORATORIAL DE CÃES SORORREATORES PARA LEISHMANIA PROVENIENTES DE INQUÉRITO SOROLÓGICO REALIZADO NO MUNICÍPIO DO RIO DE JANEIRO
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Abstract in Portuguese
As leishmanioses, na sua forma tegumentar (LT) e visceral (LV), são doenças complexas em diferentes aspectos, cujas ações de controle devem ser adequadas ao contexto epidemiológico para que possam ser efetivas. Em áreas de LV, o cão doméstico constitui a principal fonte de infecção para os insetos vetores, fato que tem direcionado esforços na identificação e eliminação dos animais soropositivos. No município do Rio de Janeiro, embora casos humanos de LV sejam raros, tem-se observado, nos últimos anos, um aumento gradual dos índices de soroprevalência canina. No ano de 2008, o programa de controle de leishmaniose identificou, nesse município, 168 cães com títulos \226540 pela técnica de imunofluorescência indireta (IFI) em sangue dessecado em papel filtro. Com o objetivo de confirmar a infecção por Leishmania, este estudo avaliou esse grupo de cães, os quais foram submetidos à eutanásia e coleta de espécimes clínicos. Coletaram-se sangue e fragmentos teciduais (pele íntegra, lesões cutâneas e de baço). O sangue foi processado e submetido às técnicas de IFI, ensaio imunoenzimático (EIE) e o teste imunocromatográfico dual pack platform (DPP). Os fragmentos teciduais foram processados para isolamento parasitário em meio de cultura e identificação por isoenzimas e fragmentos de pele íntegra para pesquisa de DNA de Leishmania através da reação em cadeia pela polimerase (PCR) Dos 168 animais identificados no inquérito, 155 foram estudados. Dos animais, 48% eram machos e 52% fêmeas oriundos de diferentes localidades. Desse grupo, 6% eram sintomáticos, 54% oligossintomáticos e 40% eram assintomáticos para LV. Na reavaliação sorológica com amostras de soro de 144 animais, no momento da eutanásia, 28% e 10% foram positivos com sensibilidade de 73% e 60%, à IFI quando antígenos de Leishmania major-like e Leishmania Leishmania chagasi foram, respectivamente, utilizados nos ensaios. No teste imunoenzimático EIE com antígeno de L. major-like e L.(L.)chagasi, 22% e 17% foram positivos com sensibilidade de 93% e 100%, respectivamente. O teste DPP demonstrou que 17% dos animais foram positivos, com sensibilidade de 93%, com amostras de soro. Trinta e nove por cento (56/144) dos animais foram positivos a sorologia independente das técnicas ou antígenos empregados O isolamento parasitário foi obtido em 29 animais, dos quais L.(L.) chagasi foi isolada de 14 e Leishmania (Viannia)braziliensis de 5 cães, este último exclusivamente em fragmentos de lesões cutâneas. Um animal apresentou infecção mista, com isolamento simultâneo de L. (V.)braziliensis e L.(L.)chagasi e de sete animais isolou-se Trypanosoma caninum exclusivamente de pele íntegra. Em dois animais, promastigotas isoladas em fragmentos de baço, foram perdidas e não puderam ser identificadas. Pela PCR, 17 animais foram positivos. Os resultados considerando todas as técnicas empregadas (cultura, IFI, EIE, DPP e PCR), demonstraram que 59% (91/155) dos animais avaliados foram negativos. Dessa forma, esse estudo alerta para as particularidades do município do Rio de Janeiro que devem ser consideradas junto ao programa de controle da leishmaniose visceral.
Abstract
Tegumentary (TL) and visceral leishmaniasis (VL) are complex diseases in different aspects, whose control actions should be appropriate to the epidemiological context in order to be effective. In areas of VL, the domestic dog is the main source of infection for insect vectors, a fact that has directed many efforts in the identifying and elimination of the seroreactive animals. In the municipality of Rio de Janeiro, although human cases of VL are rare, in recent years, has been observed a gradual increase in seroprevalence rates in dogs. In 2008, the leishmaniasis control program identified 168 dogs with titers \2265 40 by indirect immunofluorescence (IIF) on blood samples collected on filter paper. With aim to confirm infection by Leishmania, this study evaluated this group of dogs which were euthanized and collected clinical specimens. Blood and tissue samples (intact skin, spleen and cutaneous lesion) were collected. Blood was processed for serological tests as IIF, enzyme immunoassays (EIE) and immunochromatographic test pack dual platform (DPP). The tissue samples were processed for parasite isolation in culture and identification by isoenzymes electrophoresis and fragments of intact skin for detection of Leishmania DNA by the polymerase chain reaction (PCR).Of the 168 animals identified in the survey, 155 were studied. The animals originating from different localities, of which 48% were males and 52% female. Of that group, 6% were symptomatic, 54% oligosymptomatic and 40% were asymptomatic for VL In serological revaluated with serum samples from 144 animals, at the time of euthanasia, 28% and 10% were positive, with sensitivity of 73% and 60% with IIF when antigens of Leishmania major-like and Leishmania (Leishmania) chagasi were used respectively in assays. In enzyme immunoassays with antigen from L. major and L. (L.) chagasi, 22% and 17% were positive, with 93% sensitivity and 100%, respectively. The DPP test showed that 17% of animals were positive, with 93% sensitivity with serum samples. Thirty-nine percent (56/144) animals were positive in the serological tests regardless of the techniques or antigens employed in the assay. The isolation of parasite in culture was achieved in 29 animals, including L. (L.) chagasi that isolated from 14 dogs and Leishmania Viannia braziliensis from 5 dogs only in cutaneous lesions. One animal showed mixed infection with isolation of L. (V.) braziliensis and L. (L.) chagasi and 7 animals Trypanosoma caninum was isolated exclusively from intact skin. In two animals, promastigotes isolated from spleen fragments were lost and could not be identified. By PCR, 17 animals were positive. The results considering all the techniques (culture, IIF, EIE, DPP and PCR) demonstrated that 59% (91/155) animals evaluated were negative. Thus, this study alert for the peculiarities of the municipality of Rio de Janeiro that should be considered by the visceral leishmaniasis control program.
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