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Title: Trypanosoma caninum, estudo com isolados de diferentes regiões brasileiras
Advisor: Madeira, Maria de Fátima
Toma, Helena Keiko
Authors: Barros, Juliana Helena da Silva
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract: Trypanosoma caninum constitui uma nova espécie recentemente descrita n a infecção de cães domésticos. Apesar de ainda pouco conhecido e estudado, inúmeros casos da infecção natural por esse agente tem sido registrado em diferentes regiões do Brasil, fato que tem despertado o interesse pelo seu estudo. Est a tese objetivou estudar amostras de T. caninum empregando abordagens moleculares e morfológicas. Foram realizados ensaios da PCR utilizando iniciadores para diferent es regiões do gene nuclear (18S rDNA e 24S \03B1 rDNA) e do gene mitocondrial (citocromo b e região dos minicírculos) cujos produtos foram sequenciados e analisados por programas específicos. Empregou-se, também, testamos alvos direcionados para região ITS1 rDNA a partir da técnica de RFLP-PCR. Adicionalmente, foram empregadas análises por microscopia óptica e eletrônica (transmissão e varredura) Das análises moleculares foram obtidos os seguintes resultados: a) foi confirmada a identidad e de T. caninum em isolados obtidos nos estados de São Paulo, Minas Gerais, Mato Grosso, Goiás e Rio de Janeiro; b) foi verificado que o tamanho da região dos minicírculos de kDNA de T. caninum é diferente de outras espécies de tripanosomas e c) Análises filogenéticas revelaram que todos os isolados de T. caninum aqui estudados foram agrupados no mesmo cluster, independentemente da precedência geográfica ou marcador genético utilizado. Análises por microscopia óptica mostraram características mo rfológicas intrigantes, as quais foram confirmadas por microscopia eletrônica de tra nsmissão e varredura, revelando a presença de formas epimastigotas atípicas, sem flagelo livre, nos cultivos axênicos. A identificação de novos isolados e o conhecimento da sua distribuição geográfica de T. caninum são dados importantes para a compreensão desse nov o cenário epidemiológico que está sendo descrito em diferentes regiões do Brasil. Este estudo contribuiu com dados inéditos sobre T. caninum , principalmente relacionados aos aspectos morfológicos e genéticos e, representam um avanço no conhecimento biológico e genético deste novo parasito
Abstract: Trypanosoma caninum is a new species recently described from infected domestic dogs. Although still little known and studied, numerous cases of natural infection by this pathogen have been reported from different regions of Brazil, a fact that aroused our interest. In this thesis, we describe the morphological and genetic characteristics of T. caninum. Specific regions of nuclear genes (18S rDNA and 24S\03B1 rDNA) and mitochondrial genes (cytochrome b and a minicircle region) were amplified using PCR, and the resulting products were sequenced and analyzed using specific programs. It was used also to test targets directed ITS1 rDNA from the RFLP-PCR. The morphology of T. caninum was analyzed using light and electron microscopy (scanning and transmission). The results of molecular analyses a) confirmed that the isolates from São Paulo, Minas Gerais, Mato Grosso, Goiás, and Rio de Janeiro were indeed T. caninum, b) it was showed that the size of the kDNA minicircle of T. caninum is different from that of other trypanosome species and c) phylogenetic analysis revealed that all isolates of T. caninum studied here belonged to the same cluster, regardless of precedence, geographic distribution, and the genetic marker used Light microscopy analysis of axenic cultures revealed intriguing morphological features, such as atypical epimastigotes without free flagella; these findings were confirmed by scanning and transmission electron microscopy. Identification of T. caninum from clinical isolates and gathering data on its geographical distribution are important for understanding this new epidemiological scenario in Brazil. Our findings provide original morphological and genetic data on T. caninum; these data could be useful for detailed biological and genetic characterization of this newly discovered parasite, mainly related to morphological and genetic aspects, and certainly represents an advance in understanding of this new parasite
keywords: Trypanosomatina
Cães
Reação em Cadeia Da Polimerase
Microscopia Eletrônica
Issue Date: 2013
Citation: BARROS, Juliana Helena da Silva. Trypanosoma caninum, estudo com isolados de diferentes regiões brasileiras. 2013. 99 f. Tese (Doutorado em pesquisa clínica em doenças infecciosas)-Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2013.
Date of defense: 2013
Place of defense: Rio de Janeiro
Department: Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz
Program: Programa de Pós-Graduação em Pesquisa Clínica em Doenças Infecciosas
Copyright: open access
Appears in Collections:INI - PCDI - Teses de Doutorado

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