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Title: Diagnóstico diferencial e comparativo através de métodos sorológicos e moleculares da infecção por Leishmania spp. em cães residentes na região oceânica de Itaipu, município de Niterói, Rio de Janeiro
Advisor: Brazil, Reginaldo Peçanha
Souza, Cristian Ferreira de
Authors: Portella, Monique Ferreira
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract: As leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania, incluído na Ordem Kinetoplastea, Família Trypanosomatidae. São protozoários heteroxênicos e parasitas intracelulares obrigatórios. A doença no Continente Americano apresenta duas formas clínicas básicas: a Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) e a Leishmaniose Visceral (LV). Diferentes espécies de mamíferos são incriminadas como possíveis reservatórios naturais do parasita, e dentre os animais domésticos envolvidos no ciclo de transmissão das leishmanias, o cão (Canis familiaris), apresenta papel relevante. Segundo a Organização Mundial da Saúde, as leishmanioses ocorrem em quatro continentes afetando principalmente populações pobres na África, Ásia e América Latina; são consideradas endêmicas em 98 países e no Brasil têm se expandido geograficamente. Em relação ao reservatório doméstico, as alterações clínicas podem ser confundidas entre si, revelando grande impacto no contexto da doença, e por isso, é importante um diagnóstico seguro para uma notificação precisa dos casos, resultando ações efetivas nos programas de controle, evitando a eutanásia desnecessária O presente estudo teve como objetivo diagnosticar Leishmania spp. nas amostras de sangue coletadas de cães residentes da Região Oceânica de Itaipu, Município de Niterói/RJ, onde já foi constatada a circulação de algumas espécies de flebotomíneos consideradas vetoras de Leishmania, e confrontar o teste imunocromatográfico rápido, DPP, com o PCR, utilizando diferentes alvos intergênicos (ITS1 e kDNA) além de PCR(HPS70), para acurar a espécie de Leishmania spp. causadora da infecção nas amostras positivas. Os testes DPP e PCR(ITS1) foram realizados em todas as amostras e o PCR(kDNA) e PCR(HPS70) apenas nas amostras positivas para algum dos testes anteriores. Foram realizadas coletas com um total de 174 amostras de sangue de cães, compreendendo diferentes idades, raças e sexos e dessas amostras, cinco foram positivas, das quais, quatro positivas para o teste de DPP (2,29%) e uma pelo PCR utilizando o alvo intergênico ITS1. O PCR com o uso do alvo intergênico o kDNA, teve sensibilidade de 100% quando utilizado para confirmação das quatro positividades demonstradas pelo teste DPP e também pela positividade demostrada pelo PCR(ITS1). Embora os resultados do presente estudo apontem para a inexistência da doença ativa entre os 169 animais examinados, o encontro de quatro animais sororreagentes e uma positividade no PCR indica um provável contato com o parasita. Tal fato deve ser considerado em futuros inquéritos na região e em suas adjacências.
Abstract: Leishmaniasis is caused by protozoa of the genus Leishmania, included in the Order Kinetoplastida, Family Trypanosomatidae. They are heteroxenic protozoa and obligate intracellular parasites. The disease is observed in the Americas as Cutaneous Leishmaniasis (ACL) and Visceral Leishmaniasis (LV). Different species of mammals are considered as potential natural reservoirs of the parasite, and of the domestic animals involved in the transmission cycle of leishmaniasis, the dog (Canis familiaris) plays a relevant role. According to the World Health Organization, as leishmaniasis occurs on four continents, populations are found in Africa, Asia and Latin America; Considered endemic in 98 countries and in Brazil they have expanded geographically. Regarding the domestic reservoir, the clinical forms can be confused, they have a great impact in the context of the disease, so a correct diagnosis for a demand situation is important, and they allow effective results in the control programs, thus avoiding a unnecessary euthanasia The main objective of this study was to diagnose Leishmania spp. in the blood samples collected from dogs resident in the Itaipu Ocean Region, in the city of Niterói, RJ, where some species of sandflies had been considered vectors of Leishmania, confronting the rapid immunochromatographic test, DPP with molecular tests (PCR) using different intergenic targets (ITS1 and kDNA) besides PCR (HPS70) to identify the species of Leishmaniaresponsible for the infection in the positive samples. The DPP and PCR (ITS1) tests were performed on all samples and the PCR (kDNA) and PCR (HPS70) only on positive samples for some of the previous tests. A total of 174 blood samples from dogs, comprising different ages, races and sexes, were collected, 5 were positive ;, 4 positive for the DPP test (2.29%) and only one by the PCR test using the ITS1 intergenic target, which did not confirm positivity in any of the samples considered positive by DPP. The PCR using the kDNA as an intergenic target had a sensitivity of 100% when used to confirm the four positive demonstrated by the DPP test and also by the positivity demonstrated by the PCR (ITS1). Although the results of the present study point to the lack of active disease among the 169 animals examined, the finding of 4 seroreagent animals and a PCR positivity indicate a probable contact with the parasite. This fact should be considered in future surveys in the region and its surroundings.
keywords: Leishmaniose Cutânea
Leishmaniose Visceral
Cães
Diagnóstico Diferencial
Issue Date: 2018
Citation: PORTELLA, Monique Ferreira. Diagnóstico diferencial e comparativo através de métodos sorológicos e moleculares da infecção por Leishmania spp. em cães residentes na região oceânica de Itaipu, município de Niterói, Rio de Janeiro. 2018. 74 f. Dissertação (Mestrado em Medicina Tropical)-Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2018.
Date of defense: 2018
Place of defense: Rio de Janeiro
Department: Instituto Oswaldo Cruz
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz
Program: Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropical
Copyright: open access
Appears in Collections:IOC - PGMT - Dissertações de Mestrado

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