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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/29473
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2030-01-01
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- IOC - Artigos de Periódicos [12658]
Metadata
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USEFULNESS OF IN-HOUSE REAL TIME PCR FOR HBV DNA QUANTIFICATION IN SERUM AND ORAL FLUID SAMPLES
Fluido oral
Quantificação de DNA
Virus da Hepatite B
Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real
Author
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Virologia Molecular. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Hospital Universitário Clementino Fraga Filho. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Hospital Universitário Clementino Fraga Filho. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Virologia Molecular. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Hospital Universitário Clementino Fraga Filho. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Hospital Universitário Clementino Fraga Filho. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Hepatites Virais. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Abstract
For quantification of hepatitis B virus DNA (HBV DNA), commercial assays are used with serum or plasma samples, but oral fluid samples could be an alternative for HBV diagnosis due to ease of collection. This study aims to develop in-house real time PCR using synthetic curve for HBV DNA quantification for serum and oral fluid samples. Samples were collected from 103 individuals (55 HBsAg reactive and HBV DNA reactive by commercial assay and 48 without HBV markers) and submitted to two in-house real time PCR assays for HBV pre-S/S region with different standard curves: qPCR plasmidial and qPCR synthetic. A total of 27 serum samples were HBV DNA positive by qPCR plasmidial and 40 with qPCR synthetic (72% and 85% of concordance, respectively). Quantitative PCR synthetic presented efficiency of 99% and sensitivity of 2log10 copies/mL. Among oral fluid samples, five and ten were detected using qPCR plasmidial and synthetic, respectively. This study demonstrated that qPCR synthetic using serum samples could be used as alternative for HBV DNA quantification due to its sensitivity. In addition, it was possible to quantify HBV DNA in oral fluid samples suggesting the potential of this specimen for molecular diagnosis of HBV.
Keywords in Portuguese
Curva SintéticaFluido oral
Quantificação de DNA
Virus da Hepatite B
Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real
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