Avaliação in vitro e in vivo dos efeitos do composto P-MAPA isolado de Aspergillus oryzae sobre Trypanosoma cruzi

Abstract

A doença de Chagas é uma das principais causas de cardiomiopatia infecciosa no mundo. O Benznidazol (Bz) é única droga disponível no Brasil para o tratamento desta enfermidade, contudo não é totalmente eficaz e apresenta uma série de severos efeitos colaterais. Além disso, o número de casos de resistência ao tratamento tem aumentado nos últimos anos. Assim, a procura por compostos menos tóxicos e mais eficazes contra a doença de Chagas ainda é uma necessidade. O composto P-MAPA apresenta atividade imunomoduladora comprovada, além de não apresentar efeitos tóxicos em modelo murino. No presente trabalho avaliamos o efeito tripanocida e imunomodulador do P-MAPA em modelos in vitro e in vivo. Nossos resultados mostraram que o P-MAPA teve efeito sobre a viabilidade de formas tripomastigotas e reduziu a infecção de células do exsudato peritoneal (CEP) de camundongos. Além disso, o composto apresentou baixa atividade tóxica sobre as CEPs e hemácias de humano. A comparação do índice de seletividade do P-MAPA com Bz mostrou que o primeiro foi duas vezes mais seletivo ao parasito e mais seguro para as células de mamífero. As análises morfológicas e ultraestruturais de tripomastigotas mostraram que o P-MAPA causa alterações no parasito que levam a perda de viabilidade celular, e que o principal alvo intracelular seria a mitocôndria. A marcação com Rodamina 123 e MitoSox confirmou que a mitocôndria do parasito é afetada pelo P-MAPA, no entanto de forma muito discreta. O P-MAPA induziu significativamente a produção de NO e TNF e elevou, não significativamente, os níveis de IL-10 e IL-1β em CEPs infectadas por T. cruzi, sugerindo que a ação da droga sobre a forma intracelular do parasito é via ativação da resposta imune. Estudos de fase aguda da doença de Chagas mostraram que a combinação Bz 50 mg/Kg + P-MAPA 5 mg/Kg reduziu os danos cardiovasculares causados pela infecção e aumentou a sobrevida dos animais. Todos os nossos dados apontam o potencial adjuvante do P-MAPA contra a doença de Chagas.