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Title: Evaluation of a Prototype Flow Cytometry Test for Serodiagnosis of Canine Visceral Leishmaniasis
Authors: Ker, Henrique Gama
Vital, Wendel Coura
Soares, Rodrigo Dian de Oliveira Aguiar
Roatt, Bruno Mendes
Moreira, Nádia das Dores
Carneiro, Cláudia Martins
Machado, Evandro Marques de Menezes
Carvalho, Andréa Teixeira de
Martins Filho, Olindo Assis
Giunchetti, Rodolfo Cordeiro
Araújo, Márcio Sobreira Silva
Coelho, Eduardo Antonio Ferraz
Lemos, Denise da Silveira
Reis, Alexandre Barbosa
Affilliation: Universidade Federal de Ouro Preto. Programa de Pós Graduação em Ciências Farmacêuticas. Laboratório de Pesquisas Clínicas. Ouro Preto, MG, Brazil/Universidade Federal de Ouro Preto. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil
Universidade Federal de Ouro Preto. Programa de Pós Graduação em Ciências Farmacêuticas. Laboratório de Pesquisas Clínicas. Ouro Preto, MG, Brazil/Universidade Federal de Minas Gerais. Faculdade de Medicina. Pós-Graduação em Infectologia e Medicina Tropical. Belo Horizonte, MG, Brazil
Universidade Federal de Ouro Preto. Programa de Pós Graduação em Ciências Farmacêuticas. Laboratório de Pesquisas Clínicas. Ouro Preto, MG, Brazil/Universidade Federal de Ouro Preto. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil
Universidade Federal de Ouro Preto. Programa de Pós Graduação em Ciências Farmacêuticas. Laboratório de Pesquisas Clínicas. Ouro Preto, MG, Brazil/Universidade Federal de Ouro Preto. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil
Universidade Federal de Ouro Preto. Programa de Pós Graduação em Ciências Farmacêuticas. Laboratório de Pesquisas Clínicas. Ouro Preto, MG, Brazil/Universidade Federal de Ouro Preto. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil
Universidade Federal de Ouro Preto. Programa de Pós Graduação em Ciências Farmacêuticas. Laboratório de Pesquisas Clínicas. Ouro Preto, MG, Brazil/Universidade Federal de Ouro Preto. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil
Universidade Federal de Ouro Preto. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil
Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Morfologia. Belo Horizonte, MG, Brazil
Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Morfologia. Belo Horizonte, MG, Brazil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Renè Rachou Laboratório de Biomarcadores de Diagnóstico e Monitoração. Belo Horizonte, MG, Brazil
Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas. Departamento de Morfologia. Belo Horizonte, MG, Brazil
Universidade Federal de Minas Gerais. Laboratório de Biotecnologia Aplicada ao Estudo das Leishmanioses. Belo Horizonte, MG, Brazil
Universidade Federal de Ouro Preto. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunoparasitologia. Ouro Preto, MG, Brazil
Universidade Federal de Ouro Preto. Programa de Pós Graduação em Ciências Farmacêuticas. Laboratório de Pesquisas Clínicas. Ouro Preto, MG, Brazil/Universidade Federal de Ouro Preto. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas. Laboratório de Imunopatologia. Ouro Preto, MG, Brazil
Abstract: Diagnosing canine visceral leishmaniasis (CVL) is a critical challenge since conventional immunoserological tests still present some deficiencies. The current study evaluated a prototype flow cytometry serology test, using antigens and fluorescent antibodies that had been stored for 1 year at 4°C, on a broad range of serum samples. Noninfected control dogs and Leishmania infantum-infected dogs were tested, and the prototype test showed excellent performance in differentiating these groups with high sensitivity, specificity, positive and negative predictive values, and accuracy (100% in all analyses). When the CVL group was evaluated according to the dogs' clinical status, the prototype test showed outstanding accuracy in all groups with positive serology (asymptomatic II, oligosymptomatic, and symptomatic). However, in dogs which had positive results by PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP) but negative results by conventional serology (asymptomatic I), serological reactivity was not observed. Additionally, sera from 40 dogs immunized with different vaccines (Leishmune, Leish-Tec, or LBSap) did not present serological reactivity in the prototype test. Eighty-eight dogs infected with other pathogens (Trypanosoma cruzi, Leishmania braziliensis, Ehrlichia canis, and Babesia canis) were used to determine cross-reactivity and specificity, and the prototype test performed well, particularly in dogs infected with B. canis and E. canis (100% and 93.3% specificities, respectively). In conclusion, our data reinforce the potential of the prototype test for use as a commercial kit and highlight its outstanding performance even after storage for 1 year at 4°C. Moreover, the prototype test efficiently provided accurate CVL serodiagnosis with an absence of false-positive results in vaccinated dogs and minor cross-reactivity against other canine pathogens.
Keywords: canine visceral leishmaniasis
keywords: Leishmaniose visceral canina
Issue Date: 2013
Publisher: American Society for Microbiology
Citation: KER, Henrique Gama et al. Evaluation of a Prototype Flow Cytometry Test for Serodiagnosis of Canine Visceral Leishmaniasis. Clin Vaccine Immunol., v. 20, n. 12, p. 1792-1798, 2013.
DOI: 10.1128/CVI.00575-13
ISSN: 1556-6811
Copyright: restricted access
Appears in Collections:MG - IRR - Artigos de Periódicos

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