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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/31258
INVESTIGAÇÃO DIAGNÓSTICA DE PACIENTES COM MANSONELOSE SUBMETIDOS AO TRATAMENTO COM IVERMECTINA NO MUNICÍPIO DE SÃO GABRIEL DA CACHOEIRA, AMAZONAS
Suwa, Uziel Ferreira | Date Issued:
2017
Author
Advisor
Co-advisor
Comittee Member
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisas Leônidas e Maria Deane. Manaus, AM, Brasil.
Abstract in Portuguese
Mansonelose é uma Doença Tropical Negligenciada (DTN) que possui ampla distribuição geográfica na Amazônia, acometendo populações indígenas e ribeirinhas. Apesar de ter sido descrita há muitos anos, os padrões clínicos patológicos desta doença continuam sem comprovações científicas, e, por isso, tem sido negligenciada e considerada uma filariose assintomática com pouco interesse e incentivo à pesquisa, com carência de informações epidemiológicas, clinico patológicas e de tratamento. Em relação a isso, este projeto, na perspectiva de contribuir para o estudo desta endemia regional, teve por objetivo investigar os pacientes tratados com Ivermectina no município de São Gabriel da Cachoeira, em amostras coletadas após 3 meses do tratamento. Foram analisadas por testes tradicionais (gota espessa de sangue) e testes mais sensíveis (moleculares - PCR), 34 amostras de sangue. Deste quantitativo, 8 (23,5%) amostras foram confirmadas nas lâminas de gota espessa e 18 (52,9%) amostras permaneceram positivas em testes moleculares utilizando primers para a amplificação de sequências de DNA específicas para mansonelas. Desta forma, o diagnóstico molecular mostra-se mais sensível que o diagnóstico microscópico, com um aumento de (2,3%) antes do tratamento, e (2,1%) depois o tratamento. A sintomatologia declarada pelos pacientes positivos como febre, dor no corpo, dor nas articulações, dor de cabeça, frieza nas pernas, tontura e dormência nas pernas apresentaram redução após tratamento. As análises moleculares também incluíram a busca da identificação de alvos de resistência do parasito ao medicamento, tendo em vista que 18 amostras permaneceram positivas. O tratamento utilizado para eliminação de microfilaremia com uma dose de 0,15mg/kg de ivermectina, não demonstrou eficácia nos pacientes tratados no município de São Gabriel da Cachoeira, com possibilidade de reinfecção e resistência dos parasitas ao medicamento. Contudo, o diagnóstico microscópico apresenta baixa sensibilidade, principalmente em indivíduos com baixa parasitemia. Já o diagnóstico molecular tem se mostrado mais sensível, podendo ser útil em áreas de transmissão para certificação das espécies circulantes, tendo em vista que o tratamento aplicado é diferenciado para cada espécie de mansonela. A sintomatologia declarada pelos pacientes neste estudo foi semelhante à de outros estudos, e o tratamento com ivermectina
reduziu a frequência desses sintomas. Não foi identificada resistência das mansonelas ao medicamento por meio dos 12primers testados para β-tubulina, apesar disso, podem existir outros genes que estejam proporcionando a resistência e que não sejam os mesmos testados nesse estudo e que encontrem-se vinculados (ou não) especificamente para mansonelas.
Abstract
Mansonellosis is a Neglected Tropical Disease (NTD) that has a wide geographic distribution in the Amazon, affecting indigenous and riverside populations. Although it was described many years ago, the pathological clinical patterns of this disease still lack scientific evidence. It has been put aside and considered an asymptomatic filariasis which is of little interest and encouragement to be investigated thoroughly. Epidemological and pathological clinical information as well as treatment are scarce and difficult to access. Thus, this project aims to contribute to the study of this regional endemic, analysing the the blood samples collected from patients after a three- month treatment period with ivermectin in São Gabriel da Cachoeira. 34 blood samples were tested using traditional tests (thick blood drop) and more sensitive ones (molecular – PCR). Considering this quantitative, 8 (23.5 %) samples were confirmed on thick slides and 18 (52,9%) samples remained positive in molecular tests using primers for the amplification of DNA sequences specific for mansonelas. As a result, the molecular diagnosis is far more sensitive than the microscopic one, which represents an increase of 2.3% before the treatment, and 2.1% after it. The symptoms, such as fever,
headache, body pain, joint pain, cold legs, dizziness and numbness in the legs reported by patients tested positive, reduced after the treatment. Molecular analyses also included the search for the identification of resistance targets of the parasite to the drug, considering that 18 samples still remained positive. However, the microscopic diagnosis presents low sensitivity, especially with coma parasitemia. Already the molecular diagnosis has appeared more sensitive, and may be useful in areas of transmission for the test of circulating species, considering that the applied treatment is differentiated for each species of mansonella. The symptomatology reported by the patients in this study was published in other studies, and treatment with ivermectin reduced the frequency of symptoms. No drug resistance was identified by the 12 primers tested for β-tubulin; however, there are other resistance genes that are providing resistance that are not the same as those tested in this study and that are bound (or not) specifically for mansonelas.
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