A reutilização de coelhos submetidos ao Teste de Pirogênio no controle da qualidade de produtos biológicos com enfoque na Vacina Antimeningocócica AC

Abstract

Todos os produtos injetáveis de uso humano devem ser livres de pirogênio. Existem dois métodos oficiais na Farmacopéia Brasileira para a detecção da contaminação pirogênica: o Teste de pirogênio in vivo usando coelhos e o Teste do Lisado do Amebócito do Limulus (LAL). Recentemente foi incorporado na Farmacopéia Européia um terceiro teste denominado Teste de Ativação dos Monócitos (Monocyte Activation Test- MAT). Entretanto, devido a algumas limitações, o LAL e o MAT são modelos de substituição que no momento ainda não podem ser aplicados para produtos biológicos e neste contexto, a redução (3 Rs) é uma alternativa estratégica ao uso de animais. Pela Farmacopéia Brasileira, coelhos que tenham recebido produtos biológicos no teste de pirogênio in vivo não podem ser reutilizados para estes mesmos produtos, implicando na utilização de um grande número de animais para estas análises. O objetivo deste estudo foi avaliar a redução do número de coelhos através da sua reutilização para Vacina Antimeningocócica AC, verificando se estes animais continuam apresentando febre, quando administrados com amostras contaminadas com endotoxina (5UE/Kg). Este trabalho foi elaborado utilizando um desenho experimental onde os animais foram divididos em 4 grupos que receberam desde uma única injeção de vacina contaminada até o grupo que recebeu 3 injeções da vacina negativa, em intervalos de 48 horas, os quais foram desafiados no dia 7 com a vacina contaminada. Os resultados mostraram que a resposta ao estímulo positivo após as administrações da vacina negativa não demonstrou diferença estatisticamente significativa em relação à resposta ao estímulo positivo de uma única administração, independente do número de amostras negativas recebidas. Desta forma, pode-se concluir que, é possível reutilizar os coelhos até 4 vezes no período de uma semana para a Vacina Antimeningocócica AC desde que com resultado negativo, reduzindo custos e tempo de análise. Estes resultados permitem sugerir à Farmacopéia Brasileira a modificação da monografia do Teste de Pirogênio quanto à recomendação da reutilização.