Estudo de precursores eosinofílicos derivados de sangue de cordão umbilical: interação com drogas e citocinas relevantes para a inflamação alérgica

Abstract

Os corticoesteróides são as principais drogas utilizadas no controle da inflamação alérgica, na qual o eosinófilo tem um papel importante. Contudo, os corticoesteróides também têm um papel essencial na resposta de estresse, que está associada à piora clínica nas alergias. O uso de culturas de células hematopoiéticas oferece uma oportunidade para estudarmos o efeito dos glicocorticóides sobre a linhagem eosinofílica num período crítico do desenvolvimento do sistema imune. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos dos glicocorticóides sobre a diferenciação eosinofílica em cultura de sangue de cordão umbilical humano. Foram realizadas culturas líquidas por 14 a 28 dias, na presença de IL-3, IL-5 e GM-CSF, a partir de células mononucleares ou de células enriquecidas em progenitores CD34+, obtidas a partir de sanguede cordão umbilical. Adicionamos, onde indicado, dexametasona, hidrocortisona ou budesonide no início da cultura. Onde indicado, o mifepristone (RU486) foi acrescentado àsculturas para avaliar o envolvimento do receptor de glicocorticóide nos efeitos observados. Observamos, na presença de dexametasona 10 -7 M, um aumento do número de células totais, do percentual de eosinófilos e do número absoluto de eosinófilos, que foi estatisticamente significativo, em relação ao grupo controle. Com a presença de 10 -7 M de budesonide e hidrocortisona, observamos auo mento estatisticamente significativo do percentual de eosinófilos e número total de eosinófilos. Os eosinófilos após coloração com Wright-Giemsa apresentavam grau de maturidade variável, com uma significativa proporção de células com o núcleo bilobado característico da forma madura. Em culturas enriquecidas na população CD34+, a dexametasona também aumentou o número de eosinófilos recuperados no 14 o dia. Estudos cinéticos mostraram que a dexametasona, para ter efeito, precisava ser adicionada no início da cultura, sendo ineficaz quando acrescentada a partir do 14 o e do 21 o dia de cultura. No 28º. dia de cultura, não havia mais diferença significativa entre culturas experimentais e controles, sugerindo que os eosinófilos formados na presença de dexametasona sofreram envelhecimento e morte celular programada. Osefeitos da dexametasona foram bloqueados pela adição de RU486 à cultura, mostrando a importância do receptor de glicocorticóide para o efeito observado. A análise do efeito da dexametasona em experimentos realizados a partir de sangue de cordão umbilical de mães atópicas não mostrou diferença estatisticamente significativa quando comparado com experimentos realizados a partir de sangue de cordão umbilical de mães não atópicas. Desta forma, este estudo mostrou que a dexametasona, budesonide e hidrocortisona apresentam efeito potencializador sobre a linhagem eosinofílica em células hematopoiéticasderivadas de sangue de cordão umbilical humano e que estes efeitos são mediados pelo receptor de glicocorticóide.