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Title: Estudo comparativo da interação de Mycobacterium intracellulare avirulenta e virulenta com macrófagos murinos da linhagem J774
Advisor: Veras, Patricia Sampaio Tavares
Members of the board: Borojevic, Radovan
Arruda, Sérgio Marcos
Veras, Patrícia Sampaio Tavares
Authors: Silva, Tânia Regina Marques da
Affilliation: Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.
Abstract: Mycobacterium sp é um microrganismo intracelular facultativo que vive em macrófagos no interior de fagossomas que restringem a fusão com lisossomas da célula hospedeira. Recentemente foi demonstrado que micobactéria patogênica reside em vacúolos não acidificados. Células J774 pré-ativadas ou não com IFN-y foram infectadas com M intracellulare avirulenta ou virulenta na proporção de lO bacilos por célula. A virulência dos bacilos foi determinada pelas características morfológicas das colônias. Neste trabalho nós avaliamos, comparativamente, a produção de NO pelas células e a viabilidade intracelular dos bacilos. Micobactérias avirulentas induziram maior produção de NO, em comparação com as virulentas. A viabilidade intracelular dos bacilos avirulentos diminuiu pelo tratamento das células com IFN-y e foi revertida pela adição de AMG, um inibidor da iNOS. A viabilidade da variante virulenta não foi alterada pelo tratamento com IFN-y ou IFN-y e AMG. Estudos em microscopia eletrônica foram realizados para avaliar a capacidade de fagossomas fusionarem com lisossomas marcados com partículas de Au-BSA. Vinte e quatro horas após a infecção, 77% de fagossomas contendo micobactéria avirulenta fusionaram com lisossomas, em contraste com 50% de fagossomas contendo micobactéria virulenta. A fusão de fagossomas com lisossomas aumentou com o tratamento por IFN-y, enquanto que a adição de AMG provocou a redução da fusão de fagossomas formados por micobactéria avirulenta ou virulenta com lisossomas. Demonstramos que a produção de NO é dependente da virulência das micobactérias e que o NO favorece a fusão de fagossomas com lisossomas e diminui a viabilidade dos bacilos.
Abstract: Mycohacierium sp is a facultative intracellular microrganism that lives in macrophages inside phagosomes that restrict fusion with host cell lysosomes. Recently it has been shown that pathogenic Mycobacteria live in nonacified vacuoles. Cells pre-activated or not with IFN-y were infected with 10 bacilli per cell. Bacili isolated from infected C57BL/6 mice were grown in agar medium and virulence was determined by colony features. We determined the capacity of NO production by J774 cell line with avirulent or virulent mycobacteria and bacilli viability. Avirulent mycobacteria induced a higher NO production in comparison with virulent mycobacteria. The mycobacterium viability was reduced by IFN-y. This effect was blocked by AMG treatment. Electron microscopy studies were performed to evaluate the capacity of phagosomes to fuse with lysosomes labeled with BSA-colloidal gold particles. In 24h of infection 77% of phagosomes-containing avirulent M. intracellulare fused with lysosomes in contrast with 50% of phagosomes-containing virulent bacili. In J774 cells phagosome fusion with lysosomes was enhanced by IFN-y treatment. When cells were treated with IFN-y and AMG, there was a reduction of fusion of phagosome induced by avirulent ou virulent mycobacteria with lysosomes and lack of bacilum viability. This data sugests that NO can be important in the fusion of fagosomes with lysosomes. NO production depends on micobacteria virulence, and NO can induce lack of bacilum viability.
Keywords: Mycobacterium intracellulare
Mycobacterium avium-intracellulare Infection
Virulence
Interferon gama
Microbial viability
keywords: Mycobacterium
Infecção por Mycobacterium avium-intracellulare
Virulência
Interferon Tipo II
Viabilidade Microbiana
Issue Date: 2001
Publisher: Universidade Federal da Bahia
Citation: SILVA, Tânia Regina Marques da. S586e Estudo comparativo da interação de Mycobacterium intracellulare avirulenta e virulenta com macrófagos murinos da linhagem J774. 2001. 69 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal da Bahia; Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, 2001.
Date of defense: 2001
Place of defense: Salvador/BA
Department: Coordenação de Ensino
Defense institution: Universidade Federal da Bahia. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz
Program: Pós-Graduação em Patologia
Copyright: open access
Appears in Collections:BA - IGM - Dissertações de Mestrado

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