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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/34268
HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS-1 SUBTYPES AND ANTIRETROVIRAL DRUG RESISTANCE PROFILES AMONG DRUG-NAÏVE BRAZILIAN BLOOD DONORS
Antirretrovirais
Doadores de sangue brasileiros sem uso de drogas
Author
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Laboratório de Tecnologia de Diagnóstico. Seção de Diagnóstico Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Departamento de Genética. Laboratório de Virologia Animal Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de AIDS e Imunologia Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Departamento de Genética. Laboratório de Virologia Animal Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de AIDS e Imunologia Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Departamento de Genética. Laboratório de Virologia Animal Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de AIDS e Imunologia Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Rio de Janeiro. Departamento de Genética. Laboratório de Virologia Animal Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de AIDS e Imunologia Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract in Portuguese
A variabilidade genética do vírus da imunodeficiência humana-1 (HIV-1) e sua implicação no desenvolvimento de novos reagentes foram investigadas correlacionando o tempo de infecção e a resistência aos antirretrovirais. Setenta e quatro amostras de plasma de doadores de sangue brasileiros sem drogas foram testadas para desenvolver um painel de reagentes biológicos para serem usados em testes moleculares e sorológicos. Após a extração do RNA viral, o cDNA foi gerado e utilizado em protocolos nested de reação em cadeia da polimerase com primers para o ENV (C2-V3 e gp41), protease (PR) e transcriptase reversa (RT) do HIV-1. Sequenciamento genômico foi conduzido para definir subtipos de HIV-1 e mutações de resistência a drogas. Subtipo B foi encontrado em 83,8 por cento de todas as amostras, subtipo F em 2,7 por cento e mosaicos de BF em 11 por cento dos casos. B e F diferentes perfis genéticos foram evidenciados: B (PR) B (RT) B (gp120) B (gp41), F (PR) F (RT) F (gp120) F (gp41), F (PR) F (RT ) B (gp120) B (gp41), F (PR) B (RT) B (gp120) B (gp41) e B (PR) B (RT) F (gp120) B (gp41). Uma única amostra (1,4%) foi caracterizada como um mosaico BC (B (PR) C (RT) U (gp120) C (gp41)) e um mosaico AGH (AG (PR) G (RT) H (gp120) H ( gp41)) foi observado pela primeira vez no país. Resistência anti-retroviral ao inibidor de nucleosídeo RT foi observada em uma amostra (1,35%) mostrando mutações M41L e T215S. Não foram observadas mutações no inibidor não nucleosídeo RT e nas principais mutações de resistência ao inibidor de PR. Padrões antes inexprimíveis de resistência ao T20 foram encontrados entre indivíduos virgens de tratamento infectados pelo HIV-1 no Brasil. Infecções recentes foram caracterizadas em 21,6 por cento das amostras de doadores de sangue incluídas neste estudo. A disponibilidade de amostras de plasma caracterizadas e isolados de HIV permitirá o desenvolvimento de reagentes biológicos necessários para implementar programas de controle de qualidade e para desenvolver, validar e avaliar o desempenho de kits diagnósticos, considerando todas as variantes circulantes do HIV-1 no país.
Abstract
Human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) genetic variability and its implication on the development of new reagents were investigated by correlating time of infection and resistance to antiretroviral drugs. Seventy-four plasma samples from Brazilian drug-naïve blood donors were assayed to further develop a panel of biologic reagents to be used in serology and molecular tests. After viral RNA extraction, cDNA was generated and used in nested polymerase chain reaction protocols with primers for the ENV (C2-V3 and gp41), protease (PR), and reverse transcriptase (RT) of HIV-1. Genomic sequencing was conducted to define HIV-1 subtypes and drug resistance mutations. Subtype B was found in 83.8 percent of all samples, subtype F in 2.7 percent, and BF mosaics in 11 percent of the cases. B and F different genetic profiles were evidenced: B(PR)B(RT)B(gp120)B(gp41), F(PR)F(RT)F(gp120)F(gp41), F(PR)F(RT)B(gp120)B(gp41), F(PR)B(RT)B(gp120)B(gp41), and B(PR)B(RT)F(gp120)B(gp41). A single sample (1.4%) was characterized as a BC mosaic (B(PR)C(RT)U(gp120)C(gp41)) and an AGH mosaic (AG(PR)G(RT)H(gp120)H(gp41)) was first observed in the country. Antiretroviral resistance to nucleoside RT inhibitor was observed in one sample (1.35%) showing M41L and T215S mutations. Nonnucleoside RT inhibitor and major PR inhibitor resistance mutations were not observed. Previously unseen patterns of resistance to T20 were found among HIV-1-infected drug-naïve individuals in Brazil. Recent infections were characterized in 21.6 percent of the blood donor samples included in this study. The availability of characterized plasma samples and HIV isolates will allow the development of biologic reagents necessary to implement quality control programs and to develop, validate, and evaluate the performance of diagnostic kits, considering all HIV-1-circulating variants in the country.
Keywords in Portuguese
Vírus da Imunodeficiência Humana-1Antirretrovirais
Doadores de sangue brasileiros sem uso de drogas
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