Avaliação da atividade imunomoduladora potencial de compostos-líderes anti-Trypanosoma cruzi

Abstract

A doença de Chagas (DC) é um problema de saúde pública importante, não apenas na América Latina, onde é endêmica, mas também por se expandir em outras áreas, como Europa, América do Norte, Japão e Austrália. Sete milhões de pessoas estão infectadas no mundo, com aproximadamente 10 mil mortes por ano, fazendo da DC a maior causa de morte por doenças parasitárias na América Latina. Atualmente os fármacos utilizados para o tratamento da DC não são efetivos durante a fase crônica e causam número significativo de efeitos adversos. Neste contexto, o balanço da resposta imune do hospedeiro parece ser elemento-chave para o sucesso terapêutico, onde um microambiente pró-inflamatório, modulado por IL-10 demonstra-se relevante para potencializar a atividade da droga anti- Trypanosoma cruzi. O presente trabalho teve como objetivo a identificação da atividade imunomoduladora potencial dos compostos- líderes anti-T. cruzi K777, Pironaridina (PIR) e Furazolidona (FUR) em células mononucleares do sangue periférico (PBM C) de indivíduos não infectados doadores de sangue (NI) e pacientes com doença de Chagas crônica (DC). A análise dos resultados mostrou baixa toxicidade dos compostos com CC50 = 71,0 μM (K777); 9,0 μM (PIR) e superior a 20,0 μM (FUR) nas populações de PBM C. Além disso, mediante a utilização de concentrações ajustadas, K777 não demonstrou impacto sobre o Índice de Exposição (IE = cultura tratada/cultura controle) de leucócitos apoptóticos estimulados com fitohemaglutinina (PHA), enquanto os tratamentos com PIR e FUR induziram aumento do IE de monócitos e linfócitos T em estágio tardio de apoptose, em indivíduos NI. A análise do perfil de assinatura de citocinas extracelulares em sobrenadantes de cultura demonstrou um perfil pró-inflamatório misto, com elevação expressiva da citocina moduladora IL-17, em todos os tratamentos empregados em pacientes DC. Já na análise comparativa do IE de subpopulações de PBM C aos compostos- líderes de interesse, K777 demonstrou-se capaz de induzir uma resposta pró- inflamatória (CD14+TNF-α+, T CD4+IFN-γ+) modulada por IL-10 (TCD4+IL-10+, T CD8+IL-10+), enquanto os compostos PIR e FUR desencadearam uma resposta mais inflamatória pelo aumento de CD14+TNF-α+ e redução de IL-10 proveniente de populações T CD4+ e T CD8+. As análises de assinatura das citocinas intracitoplasmáticas corroboraram com os perfis pró-inflamatório/modulado (K777) e pró-inflamatório (PIR e FUR), encontrados para estes compostos. Desta forma, os resultados deste trabalho permitem concluir que o composto-líder K777 é capaz de induzir mudanças benéficas no perfil imunológico de pacientes na fase crônica da DC que poderiam potencializar a sua efetividade durante o tratamento da doença.