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Title: Novos procedimentos operacionais padrão para gerenciamento e manipulação de amostras biológicas criopreservadas em nitrogênio líquido: estudo de caso no Laboratório de Pesquisa Clínica e Vigilância em Leishmaniose
Advisor: Schubach, Armando de Oliveira
Madeira, Maria de Fátima
Members of the board: Cupolillo, Elisa
Temporal, Rosane Maria
Silva, Aline Fagundes da
Marzochi, Mauro Célio de Almeida
Authors: Paes, Luiz Eduardo de Carvalho
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract: Introdução: Atualmente a melhor técnica utilizada para garantir a preservação de material biológico é a criopreservação, que compreende a estocagem de material a baixas (em freezer) ou a ultra-baixas temperaturas (em nitrogênio líquido). O Laboratório de Pesquisa Clínica e Vigilância em Leishmaniose utiliza a técnica de criopreservação em nitrogênio líquido (N2L) e armazena aproximadamente 5.000 estoques de Leishmania spp em criotubos (de 2 mL cada) distribuidos em seis botijões criogênicos (containers), totalizando 11.610 posições possíveis de armazenamento. Entretanto, o uso e a manipulação constante do NL2 oferecem alguns riscos (químicos, biológicos e ergonômicos). A manutenção e o manuseio das amostras biológicas estocadas não são realizados em um local apropriado, nem de forma segura, e o processo para a localização de amostras é lento. Objetivo: Desenvolver novos Procedimentos Operacionais Padrão (POP) para gerenciamento e manipulação de amostras biológicas criopreservadas em N2L Materiais e Métodos: Para cumprir os objetivos foram desenvolvidos três POPs: 1) Modernizar a metodologia de envase ou reposição de N2L nos containers contendo as amostras biológicas [cepas de Leishmania]; 2) Desenvolver uma metodologia mais segura de manipulação dos criotubos contendo as amostras criopreservadas em containers de N2L; e 3) Desenvolver um Banco de Dados informatizado (em uma planilha do software Microsoft Office Excel 2016) com a localização de todas as amostras biológicas criopreservadas nos containers de N2L. Resultados e Conclusões: Com a adoção destes novos procedimentos para o gerenciamento e a manipulação de amostras biológicas, pretende-se tornar a metodologia mais prática, segura e econômica, minimizando os riscos químicos, biológicos e ergonômicos para as pessoas que manipulam o N2L.
Abstract: Introduction: Cryopreservation is the best process to guarantee the preservation of biological material, comprising the storage of these materials at low temperatures (in freezer) or at ultra-low temperatures (in liquid nitrogen). The Laboratory of Clinical Research and Surveillance in Leishmaniasis employs cryopreservation in liquid nitrogen (LN2) as an important process to maintain Leishmania parasites isolate from different sources. This laboratory maintains approximately 5,000 stocks under LN2, corresponding to more than 1,000 Leishmania strains. The stocks are distributed in six containers, counting for 11,610 possible positions of storage. Maintenance and handling of these stocks are not performed in a safe manner. Furthermore, the process for stock location is not well organized, resulting in a time-consuming activity. Objective: To develop Standard Operating Procedures (SOP) for management and maintenance of biological samples cryopreserved in LN2 Materials and Methods: Three SOPs were developed: 1) To improve the N2L filling or replenishment methodology in containers containing biological samples (Leishmania strains); 2) To develop a safer methodology for handling biological samples cryopreserved in LN2 containers; and 3) To develop a computerized database (using Microsoft Office Excel 2016 software worksheet) presenting the location for all stocks of each biological sample maintained in the LN2 containers. Results and Conclusions: The adoption of the new procedures develop in this study, for maintenance and recovery of samples, intends to turn the methodology more practical, more economical and safer, minimizing the chemical, biological and ergonomic risks for people handling LN2.
keywords: Nitrogênio
Criopreservação
Leishmania
Procedimento operacional padrão
DeCS: Bancos de Espécimes Biológicos
Leishmaniose
Issue Date: 2017
Citation: PAES, Luiz Eduardo de Carvalho. Novos procedimentos operacionais padrão para gerenciamento e manipulação de amostras biológicas criopreservadas em nitrogênio líquido: estudo de caso no Laboratório de Pesquisa Clínica e Vigilância em Leishmaniose. 2017. 78 f. Dissertação (Mestrado em Pesquisa Clínica)-Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2017.
Date of defense: 2017
Place of defense: Rio de Janeiro/RJ
Department: Pós-Graduação em Pesquisa Clínica
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas.
Program: Programa de Pós-Graduação em Pesquisa Clínica
Copyright: open access
Appears in Collections:INI - MPPC - Dissertações de Mestrado Profissional

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