Metaloproteinases de matriz e seus moduladores induzidos na infecção pelo HPV in situ e in vitro

Abstract

A infecção por HPV tem se tornado uma das infecções sexualmente transmissíveis mais prevalentes no mundo, sendo a causa primária do câncer cervical. O processo inflamatório cervical causado pelo HPV e subsequente desenvolvimento de lesões pre-malignas são induzidas direta ou indiretamente por um sistema complexo de interação entre oncogenes e fatores do hospedeiro, secretados por queratinócitos, células imunes e matriz extracelular (MEC). O desenvolvimento e modelamento da MEC pode ser regulado através da expressão de metaloproteinases (MMP), que tem sido associada a diversos tipos de tumores. Assim, no presente trabalho objetivamos identificar e associar as expressões de MMP -2, -7 e -9 e seus moduladores TIMP-2, EphA2, EfrinaA1 e TNF-\03B1 em lesões de colo uterino. Para isto, incluímos 30 mulheres com idades entre 24 e 57 anos. Destas, 15 apresentaram lesões de colo uterino de alto grau (HSIL) e 15 eram mulheres histerectomizadas sem lesões associadas a infecção pelo HPV. Avaliamos a expressão das MMPs por imunohistoquímica no epitélio e estroma das amostras incluídas. Observamos um aumento de todas as MMPs e seus moduladores no estroma das lesões do grupo com HSIL comparados com o grupo controle, principalmente MMP-2, -9 e EphA2, reforçando papéis no processo de degradação e invasão. Desta forma, concluímos que MMP-2, MMP-9 e EphA2 possuem papel no desenvolvimento de lesões de alto grau. Além do trabalho in vivo, nosso estudo buscou avaliar o papel in vitro da citocina pró-inflamatrória TNF-\03B1 na modulação da expressão das MMPs e seus moduladores em linhagens cervicais de queratinócitos infectados (HeLa) ou não (C33A) por HPV. Para tanto, avaliamos a expressão de RNAm destes marcadores por PCR em tempo real (qPCR). Observamos um aumento da expressão do RNAm destes marcadores, exceto MMP-9 e EphA2, em HeLa quando relacionados com a expressão em C33A, sugerindo que a presença do HPV de alto risco em HeLa possa estar influenciando na expressão gênica destes marcadores. Diante disto, concluímos que TNF-\03B1 possui papel modulador na expressão de RNAm das MMPs e seus moduladores, exceto EphA2, exclusivamente em linhagens de queratinócitos infectados pelo HPV.