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Title: Clonagem, expressão e caracterização imunológica do gene Rv1419 de Mycobacterium Tuberculosis
Advisor: Barral Netto, Manoel
Members of the board: Cavada, Benildo Sousa
Veras, Patricia Sampaio Tavares
Barral Netto, Manoel
Authors: Nogueira, Lucas de Lima
Affilliation: Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.
Abstract: A Tuberculose (TB) é uma doença infecciosa causada por um patógeno exclusivamente humano, o Mycobacterium Tuberculosis (Mtb). Nosso objetivo foi avaliar se uma nova lectina do Mtb, Rv1419p, apresenta um papel modulatório em macrófagos J774 in vitro assim como investigamos a resposta imune celular de pacientes com Tuberculose a essa proteína. Um banco de dados de lectinas, de diferentes espécies, foi construído para a mineração das sequências de proteínas hipotéticas que foram geradas a partir da análise de genoma de M. Tuberculosis H37Rv. Identificamos uma proteína hipotética codificada pelo gene Rv1419 e produzimos a proteína recombinante. Observamos que a produção de TNF-a induzida pela proteína recombinante foi dependente do tempo e da dose, mas independente do domínio lectínico. Observamos também por imunofluorescência que a proteína recombinante foi capaz de interagir com a superfície celular de macrófagos J774 em cultura. Em adição, observamos que níveis detectáveis de citocinas Th1 (IFN-y e THF-a) e Th2 (IL-10) foram secretadas por CMSP de pacientes com Tuberculose em resposta a proteínas do filtrado de cultura do bacilo (CFP) e à proteína recombinante, demonstrando que a Rv1419p é capaz de induzir uma resposta imune celular em pacientes com Tuberculose.
Abstract: Tuberculosis (TB) is an infectious disease caused by Mycobacterium tuljerculosis, which is an obligatory human pathogen. Our objective was to evaluate whether one novel lectin from M. tuberculosis, Rvl419p, have a modulatory role in macrophages J774 in vitro. Moreover, we investigated the cellular immune response of TB patients. A data base of lectins from different species was carried out in order to search hypothetical protein sequences that were generated from the analysis of the M. tuberculosis H37Rv genome. We identified a hypothetical protein codified by i?vl419 gene and the recombinant protein production was then performed. We observed that TNF-a production induced by re-Rvl419p was time and dose-dependent, but lectin- independent. In parallel experiments, we observed that re-Rvl419p was able to interact with J774 macrophages, particularly at a cell surface level. In addition, we observed that detectable levels of Thl (IFN-y e TNF-a) e Th2 (IL-10) cytokines were secreted by PBMC of TB patients in response to culture filtrate proteins (CFP), which are known to contribute to the immunology of tuberculosis, and single antigen (re-Rvl419p). These results indicate that the Rv1419p was able to induce immune cellular responses in TB patients.
Keywords: Mycobacterium tuberculosis
Tuberculosis
Lectins
Recombinant Proteins
Computational Biology
keywords: Mycobacterium Tuberculosis
Tuberculose
Lectinas
Proteínas Recombinantes
Biologia Computacional
Issue Date: 2008
Publisher: Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz
Citation: NOGUEIRA, Lucas de Lima. Clonagem, expressão e caracterização imunológica do gene Rv1419 de Mycobacterium Tuberculosis. 2008. 86 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal da Bahia; Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, 2008.
Date of defense: 2008
Place of defense: Salvador/BA
Department: Coordenação de Ensino
Defense institution: Universidade Federal da Bahia. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz
Program: Pós-Graduação em Patologia
Copyright: open access
Appears in Collections:BA - IGM - Dissertações de Mestrado

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