Uso da técnica de citometria de fluxo em estudos de imunotoxicologia em roedores e humanos

Abstract

O avanço nas áreas de toxicologia e imunologia associadas a novas descobertas sobre desordens sistêmicas vêm possibilitando estudos mais profundos relacionados a processos patológicos. A população está cada dia mais exposta a diversos tipos de produtos químicos de uso diário, seja pela alimentação, respiração, contato ambiental ou uso de cosméticos. A exposição diária a substâncias químicas com potencial tóxico pode gerar diversos prejuízos à saúde da população. Por isso, é necessário realizar pesquisas em torno de metodologias que são capazes de avaliar alterações nos indivíduos expostos, pois o diagnóstico precoce de doenças pode facilitar tratamentos e evitar agravos. A Citometria de Fluxo (CF) tem sido o método preferencial para a determinação do status de populações celulares, sendo largamente utilizada na análise de alterações em células sanguíneas. O objetivo desse trabalho foi implantar a metodologia de imunofenotipagem da análise de células (de murinos ou humanos) no Laboratório de Farmacologia do Departamento de Farmacologia e Toxicologia (DFT) por CF, observando parâmetros das populações de linfócitos T CD3+ (linfócitos T totais) e subpopulações CD4+ (linfócitos T helper ativados ou não ativados) e CD8+ (linfócitos T citotóxicos) para avaliação imunofenotípica de exposição a agentes imunomoduladores. Foram analisadas amostras de dois projetos os quais visam avaliar influência de compostos tóxicos no sistema imune. O primeiro avaliou amostras de sangue periférico de indivíduos expostos ocupacionalmente ao benzeno comparados a trabalhadores não expostos. O segundo analisou células de triturado de baço retirado de grupos de camundongos expostos ao octil metoxinamato, propiltiouracil e ao óleo de milho. Ambos os experimentos mostraram razões LT CD4+/CD8+ menores em grupos expostos as substâncias estudadas que o grupo Controle (indivíduos não expostos). A Citometria de Fluxo se mostrou uma metodologia segura para o diagnóstico de alterações imunológicas e eficiente para os estudos realizados. O DFT encontra-se apto a disponibilizar o serviço para pedidos externos, o qual possui a expertize para execução da análise.