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- IOC - Artigos de Periódicos [12494]
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INSULARINASE A, A PROTHROMBIN ACTIVATOR FROM BOTHROPS INSULARIS VENOM, IS A METALLOPROTEASE DERIVED FROM A GENE ENCODING PROTEASE AND DISINTEGRIN DOMAINS
Coagulação
Endothelial cell
Metaloprotease
Ativador de protrombina
Veneno de cobra
Coagulation
Endothelial cell
Prothrombin activator
Snake venom
Metalloprotease
Author
Affilliation
Instituto Butantan. Laboratório de Bioquímica e Biofísica. São Paulo, SP, Brasil.
Instituto Butantan. Centro de Biotecnologia. São Paulo, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Fisiologia e Farmacodinâmica. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Instituto Butantan. Laboratório de Bioquímica e Biofísica. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade Federal de São Paulo. Departamento de Bioquímica. São Paulo, SP, Brasil.
Instituto Butantan. Centro de Biotecnologia. São Paulo, SP, Brasil / Universidade de São Paulo. Instituto de Biociências. Instituto de Química. São Paulo, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Fisiologia e Farmacodinâmica. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Instituto Butantan. Laboratório de Bioquímica e Biofísica. São Paulo, SP, Brasil.
Instituto Butantan. Centro de Biotecnologia. São Paulo, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Fisiologia e Farmacodinâmica. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Instituto Butantan. Laboratório de Bioquímica e Biofísica. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade Federal de São Paulo. Departamento de Bioquímica. São Paulo, SP, Brasil.
Instituto Butantan. Centro de Biotecnologia. São Paulo, SP, Brasil / Universidade de São Paulo. Instituto de Biociências. Instituto de Química. São Paulo, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Fisiologia e Farmacodinâmica. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Instituto Butantan. Laboratório de Bioquímica e Biofísica. São Paulo, SP, Brasil.
Abstract
The first low-molecular-mass metalloprotease presenting prothrombin activating activity was purified from Bothrops insularis venom and named insularinase A. It is a single-chain protease with a molecular mass of 22 639 Da. cDNA sequence analysis revealed that the disintegrin domain of the precursor protein is post-translationally processed, producing the mature insularinase A. Analysis of its deduced amino acid sequence showed a high similarity with several fibrin(ogen)olytic metalloproteases and only a moderate similarity with prothrombin activators. However, SDS-PAGE of prothrombin after activation by insularinase A showed fragment patterns similar to those generated by group A prothrombin activators, which convert prothrombin into meizothrombin independently of the prothrombinase complex. In addition, insularinase A activates factor X and hydrolyses fibrinogen and fibrin. Chelating agents fully inhibit all insularinase A activities. Insularinase A induced neither detachment nor apoptosis of human endothelial cells and was also not able to trigger an endothelial proinflammatory cell response. Nitric oxide and prostacyclin levels released by endothelial cells were significantly increased after treatment with insularinase A. Our results show that, although its primary structure is related to class P-I fibrin(ogen)olytic metalloproteases, insularinase A is functionally similar to group A prothrombin activators.
Keywords in Portuguese
Bothrops insularisCoagulação
Endothelial cell
Metaloprotease
Ativador de protrombina
Veneno de cobra
Keywords
Bothrops insularisCoagulation
Endothelial cell
Prothrombin activator
Snake venom
Metalloprotease
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