Author | Campos, Rozalia Mendes Figueira | |
Author | Magalhães, Juracy Barbosa | |
Author | Reis, Eliana Almeida Gomes | |
Author | Reis, Mitermayer Galvão dos | |
Author | Andrade, Sonia Gumes | |
Access date | 2012-07-17T20:32:19Z | |
Available date | 2012-07-17T20:32:19Z | |
Document date | 2002 | |
Citation | CAMPOS, R.F. et al. Sensitivity of polymerase chain reaction for detection of known aliquots of Trypanosoma cruzi in the blood of mice: an in vitro study. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 35, n. 5, p. 487-90, sep./oct. 2002. | pt_BR |
ISSN | 0037-8682 | |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/4174 | |
Abstract in Portuguese | A sensibilidade da reação em cadeia da polimerase (PCR) para revelar a presença de números
conhecidos de tripomastigotas no sangue de camundongos, foi investigada em três experimentos separados.
No primeiro, foram adicionados 1, 2, 3, 4, 5, 10, 20 e 50 tripomastigotas respectivamente, em oito amostras de
500μl de sangue de camundongo. No 2o e 3o experimentos: foram feitas 10 amostras contendo 1, e 10 amostras
contendo 2 tripomastigotas/500μl de sangue. Controle positivo: 500μl de sangue contendo 100.000
trypomastigotas. Para amplificação dos minicirculos do kDNA pela PCR foram usados os iniciadores S35 e
S36. A PCR revelou produtos de 330 p.b nos controles positivos e nas amostras contendo de 3 a 50
tripomastigotas. Quando apenas uma amostra contendo 1 ou 2 tripomastigotas foi examinada, os resultados
foram negativos, porém no 2o e 3o experimentos 9/10 amostras contendo 1 e 2 tripomastigotas foram PCR
positivas, revelando alta sensibilidade da reação. Em conclusão, a presença de um só parasito em 500μl de
sangue é suficiente para uma PCR positiva e este método pode ser usado como complementação dos demais
testes parasitológicos de cura, em camundongos tratados, quando pequenos volumes de sangue são
individualmente examinados. | pt_BR |
Language | eng | pt_BR |
Rights | open access | |
Subject in Portuguese | Trypanosoma cruzi | pt_BR |
Subject in Portuguese | Reação em cadeia da polimerase | pt_BR |
Subject in Portuguese | Sensibilidade da PCR em camundongos | pt_BR |
Subject in Portuguese | PCR como teste de cura | pt_BR |
Title | Sensitivity of polymerase chain reaction for detection of known aliquots of Trypanosoma cruzi in the blood of mice: an in vitro study. | pt_BR |
Type | Article | pt_BR |
Abstract | To evaluate the sensitivity of polymerase chain reaction (PCR) to reveal known number of
trypomastigote in the blood of mice, three separate experiments were done. First: To eight samples of 500μl of
normal mice blood, one aliquot of 1, 2, 3, 4, 5, 10, and 50 trypomastigotes respectively, were added. Second
and third: 10 aliquots with 1 and 10 with 2 trypomastigotes were added to samples of 500μl of normal mice
blood. Positive control: 500μl of blood containing 100,000 trypomastigotes. For kDNA minicircles amplification
by PCR the primers:S35 and S36 were used. PCR revealed products of 330 b.p in the positive controls. When
only one sample with the aliquots of 1 or 2 trypomastigotes was examined, results were negative; results were
positive with aliquots of 3 to 50 trypomastigotes. In the 2nd and 3rd experiments, 9/10 aliquots with one parasite
and 9/10 with 2 trypomastigotes were positive revealing a high sensitivity of this reaction. In conclusion, the
presence of one single parasite in 500μl of blood, is enough for a positive PCR. This method could be used as
a complement to the various parasitological cure tests in treated mice, when low volumes of blood are individually
examined | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil | pt_BR |
Subject | Trypanosoma cruzi | pt_BR |
Subject | Polymerase chain reaction | pt_BR |
Subject | PCR sensitivity in mice | pt_BR |
Subject | PCR as cure test in mice | pt_BR |
xmlui.metadata.dc.title.original | Sensibilidade da reação em cadeia da polimerase para a detecção de alíquotas conhecidas do Trypanosoma cruzi no sangue da camundongos: estudo in vitro | pt_BR |
DeCS | Reação em Cadeia da Polimerase | pt_BR |
DeCS | Trypanosoma cruzi/isolamento & purificação | pt_BR |
DeCS | Animais | pt_BR |
DeCS | DNA de Cinetoplasto/sangue | pt_BR |
DeCS | Camundongos | pt_BR |
DeCS | Sensibilidade e Especificidade | pt_BR |