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Title: Avaliação de parâmetros moleculares para vigilância entomológica do Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762)
Advisor: Silva, Luciano Kalabric
Members of the board: Melo, Paulo Roberto Santana de
Fernandes, Flora Maria de Campos
Authors: Souza, Kathleen Ribeiro
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
Abstract: Apesar do combate recorrente ao mosquito vetor da dengue, o Aedes aegypti, mais de 80% dos estratos da cidade de Salvador-BA apresentam condição de alerta ou risco de surto de dengue. Visto que as abordagens tradicionais para controle do mosquito vetor da dengue não têm produzido os efeitos esperados, o presente estudo avaliou parâmetros moleculares para vigilância entomológica do A. aegypti utilizando ferramentas de geotecnologia e de genética de populações como forma de apoiar o trabalho de campo e ações integradas das instâncias responsáveis pelo controle da dengue. O desenho do estudo apresentou um componente transversal, descrevendo dados sobre a genética de população de larvas de A. aegypti coletadas em Salvador e amostras controle coletadas no ano de 2009 em Jacobina e Vitória da Conquista, além da cepa Rockfeller, e um longitudinal, sobre amostras de quatro áreas (Plataforma, Itapagipe, Tancredo Neves e Itapuã) durante quatro ciclos do LIRAa Salvador entre 2007 a 2009. O DNA de cada larva foi isolado pelo método DNAzol® e genotipado por 5 marcadores SSR através da técnica de PCR e eletroforese capilar. A distribuição espacial dos criadouros foi realizada utilizando-se ortofotos pelo programa Arcview v. 9.3. Para a análise da diferenciação populacional e teste de hipótese foram utilizados os programas GenePop, GenAlEx e Spade, e para inferência populacional utilizamos o programa structure. Os marcadores encontraram-se, em geral, em equilíbrio de H-W e comportaram-se como independentes. Quando utilizamos a estatística Φpt e RST foi possível discriminar significantemente (p<0,05) populações geneticamente diferenciadas de A. aegypti a nível de município, áreas do município de Salvador e estratos pertencentes a estas áreas. O programa structure indicou K igual a 2 populações como ideal para representar os dados, considerando a população de Salvador uma miscigenação de populações de A. aegypti de outras regiões do estado. Os resultados do estudo longitudinal mostraram uma diferenciação entre os ciclos de 2008.3 e 2009.4. As medidas de Ne variaram consideravelmente por área e ciclo evidenciando o efeito de gargalo de garrafa em diferentes períodos em cada área, apesar de não haver correlação com o IIP. A partir dos resultados obtidos, concluímos que o controle vetorial produz alterações sobre a estrutura populacional do A. aegypti, mas que não são efetivas. O uso do georreferenciamento e de informações genéticas do vetor poderiam contribuir para a definição das áreas de abrangência das populações do A. aegypti e para a tomada de decisões a respeito do manejo do tratamento.
Abstract: Despite the recurring attempts to combat the mosquito vector of dengue, Aedes aegypti, more than 80% of the strata of the city of Salvador-BA show alert condition or risk of an outbreak of dengue. Since traditional approaches to control the mosquito vector of dengue have not produced the expected results, this study evaluated molecular parameters for entomological surveillance of A. aegypti using tools of geotechnology and population genetics as a way of supporting the fieldwork and integrating the actions of the authorities responsible for integrated dengue control. The design of the study had a transverse component, describing data on the population genetics of larvae of A. aegypti collected in Salvador and control samples collected in 2009 in Jacobina and Vitoria da Conquista, in addition to the Rockefeller strain, and a longitudinal samples from four areas (Plataforma, Itapagipe, Tancredo Neves and Itapuã) for four cycles LIRAa of Salvador between 2007 to 2009. The DNA of each larva was isolated by the DNAzol ® method and genotyped with five STR (short tandem repeat) markers by PCR and capillary electrophoresis. The spatial distribution of breeding sites was performed using ortophotos by the program ArcView v.9.3. For the analysis of population differentiation and hypothesis testing the programs GenePop, GenAlEx Spade were used, and for population inference the program structure was used. The markers were usually found to be in H-W equilibrium and behaved as independent. When we use the statistics Φpt and RST it was possible to discriminate (p <0.05) genetically differentiated populations of A. aegypti at the municipal level, between areas of Salvador and strata within these areas. The program structure indicated K equal to 2 populations as ideal to represent the data, considering the population of Salvador is a mixture of populations of A. aegypti in other regions of the state. The results of the longitudinal study showed a difference between the cycles of 2008.3 and 2009.4 Ne measures varied considerably by area and cycle showing the effect of bottleneck in different periods in each area, although no correlation with the IIP. Given these results we conclude that the vector control produces changes on the population structure of A. aegypti, but are not effective. Tthe use of georeferencing and vector’s genetic information could help define the catchment areas of populations of A. aegypti and for making decisions about the management of treatment.
Keywords: Aedes Aegypti
Microsatellites
Entomological surveillance
Genetic markers
keywords: Aedes Aegypti
Microssatélites
vVgilância entomológica
Marcadores genéticos
Issue Date: 2011
Citation: SOUZA, K. R. Avaliação de parâmetros moleculares para vigilância entomológica do Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762). 2011. 74 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa) - Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz, Salvador, 2011.
Date of defense: 2011
Place of defense: Salvador
Department: Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz
Program: Pós-Graduação em Biotecnologia em Saúde e Medicina Investigativa
Copyright: open access
Appears in Collections:BA - IGM - Dissertações de Mestrado

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