Identificação molecular de amostras de Legionella pneumophila provenientes de fontes ambientais

Abstract

Legionella pneumophila (Lp) é uma bactéria Gram negativa encontrada em ambientes aquáticos naturais e artificiais nos quais a inalação de aerossóis contaminados pode causar uma pneumonia severa conhecida como Doença dos Legionários com taxa de mortalidade de 10% em indivíduos saudáveis. No Brasil há poucas informações a respeito deste patógeno, mas sabe se que a Pneumonia Adquirida na Comunidade foi responsável por 598.668 hospitalizações e 52.776 mortes só no ano de 2017 e acredita-se que uma porcentagem significativa desses casos seja causada pela Lp. Além disso, os casos de legioneloses vêm crescendo ao redor do mundo e um dos fatores associados a isto é o aumento de sistemas artificiais de água e da exposição humana a fontes contaminadas. A única forma de prevenir a doença dos legionários é pelo controle e tratamento destes ambientes artificiais, especialmente aqueles em grandes edifícios. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi caracterizar amostras de Legionella spp. provenientes de fontes ambientais previamente identificadas pela Conforlab. O estudo contou com 50 amostras de Legionella spp. isoladas em meio BCYE a partir de diversas fontes ambientais em nove estados brasileiros fornecidas pela empresa Conforlab. A identificação molecular das amostras foi realizada pela técnica Sequence-based Typing que consiste no sequenciamento e análise de sete genes para a obtenção de um Sequence Type (ST). As amostras foram obtidas de amostras provenientes de hotéis, centros comerciais, laboratórios, empresa e indústria. Cerca de 70% das amostras são da região sudeste do país e 50% do estado de São Paulo. Foram identificados 11 STs entre 34 amostras, dos quais oito são previamente descritos e três STs novos (ST2960, ST2962 e ST2963). Dois complexos clonais foram identificados CC-ST1 e CC-ST1642. O novo ST2960 foi identificado em quatro diferentes torres de resfriamento. O sequenciamento genômico foi realizado em duas amostras de Legionella spp. no qual a sequência da amostra 20935 corresponde a espécie Lp enquanto o outro genoma apresentou maior similaridade com a espécie Legionella anisa, sendo essa a segunda espécie do gênero mais encontrada em amostras de água. Como esperado ST1 foi prevalente, pois é amplamente distribuído na maioria dos países, e os outros STs previamente descritos estão associados às legioneloses em outros países. Dado o grande número de casos de pneumonia anualmente, estima-se que ocorra no Brasil cerca de seis mil óbitos por ano devido à doença dos legionários. Portanto, é necessário que medidas de vigilância e controle da presença de Legionella spp. sejam implementadas, além da realização de mais estudos para a maior compreensão deste patógeno no país