Ácido delta aminolevulínico desidratase (ALAD) de Tilápia (Oreochromis niloticus) no monitoramento do chumbo no ambiente aquático

Abstract

O chumbo é um metal com características físico-químicas largamente empregadas na indústria levando à sua grande dispersão no ambiente. O chumbo causa alguns efeitos hematológicos na biogênese do radical Heme da hemoglobina inibindo a enzima delta aminolevulínico desidratase (ALAD; EC 2.4.1.24). O objetivo desse estudo é avaliar o potencial da tilápia (Oreochromis niloticus), que resiste a muitas condições adversas e está sendo extensamente cultivada para monitorar o chumbo em ambiente aquático usando ALAD como biomarcador. Machos de tilápia pesando ao redor de 200g foram obtidos de um criador comercial e até três peixes foram aclimatados em tanques de plástico contendo 40L de água filtrada por celulose e carvão ativado sob aeração constante. Os peixes foram anestesiados com eugenol e injetados através do peritônio com doses de 1, 10 e 100mg de acetato de chumbo por kg de peixe. Depois de 24 horas, os peixes foram anestesiados com eugenol e o sangue foi coletado por punção da veia caudal e o fígado foi coletado depois do sacrifício por secção da espinha dorsal. A atividade de ALAD foi determinada no sangue e em homogeneizados de fígado pelo de método de SAKAI (Int. Arch. Occup. Environ. Health 68(2):126-32, 1996) sem usar DTT, que não reativa a ALAD de tilápia. Nos controles, a atividade de ALAD foi 2327±359μmol de porfobilinogênio (PBG) por hora (Unidades) por litro de eritrócito para sangue e 374±82 Unidades por kg de tecido para fígado. A dose in vivo que inibiu 50% de atividade de ALAD (IC50) foi 0,114mg/kg para sangue e 8,511mg/kg para fígado, indicando que a enzima de sangue é 75 vezes mais exposta que a enzima de fígado nesse peixe. O nível de chumbo no sangue (Pb-S) foi 276μg/L com a dose de 1mg/kg, uma concentração de chumbo 2.42 vezes maior que o IC50 calculado, com uma total recuperação da atividade de ALAD depois de sete dias para sangue e somente dois dias para fígado. Em conclusão, esses resultados indicam que a atividade de ALAD de sangue de tilápias pode ser usada para monitorar chumbo e que é necessário determinar os valores normais porque DTT não reativa a ALAD desse peixe.