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AVALIAÇÃO DA UTILIZAÇÃO DE MEMBRANAS TROCA-IÔNICA NA PURIFICAÇÃO DE ERITROPOETINA HUMANA RECOMBINANTE
Eritropoetina recombinante
Biofármacos
Cromatografia
Troca Iônica
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Abstract in Portuguese
Nesta avaliação, realizaram-se ensaios cromatográficos de purificação
de eritropoetina humana recombinante, a partir do sobrenadante de cultura de
células de mamíferos da linhagem CHO (células de ovário de hamster chinês),
produtoras deste biofármaco. Compararam-se as membranas comerciais de troca iônica Sartobind (MA) Q e D, com o objetivo de avaliar a sua aplicabilidade a processos de purificação de EPO.
Ambas as membranas apresentaram-se capazes de adsorver EPO nas condições avaliadas. EPO foi detectada nas amostrasde eluído de ambas as membranas, tendo-se verificado que o imunoensaio dotipo dot-blotfoi aquele
que forneceu as informações mais conclusivas. Já nas análises de eletroforese, verificou-se um perfil difuso das bandas do eluído das membranas, o que foi creditado à heterogeneidade glicídica da EPO, como anteriormente demonstrado na literatura.
Abstract
In the present work, the purification of recombinant human erythropoietin (rhEPO) from CHO (Chinese hamster ovary) cell culture supernatant was investigated using anion-exchange chromatography. Commercial membrane adsorbers (Sartobind D and Q) were compared, with the aim of evaluating their
aplicability to EPO purification processes.
Both membranes were able to adsorb EPO under the conditions evaluated in this work. EPO was detected in the eluate of both membranes. The immunoassay dot-blot was the most interesting analytical tool, giving the most conclusive results. Electrophoretic analyses showeda diffuse band, probably
due to glycan heterogeneity in the EPO molecules, as previously reported in the
literature.
Keywords in Portuguese
BiotecnologiaEritropoetina recombinante
Biofármacos
Cromatografia
Troca Iônica
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