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CRISPR / CAS-9 VECTOR SYSTEM: TARGETS UL-39 AND INHIBITS HSV-1 REPLICATION IN VITRO
Raposo, Jéssica Vasques et al. | Date Issued: 2021
Author
Raposo, Jéssica Vasques
Barros, Luciana Rodrigues Carvalho
Torres, Lauana Ribas
Pinto, Rafaela Barbosa da Silva
Lopes, Amanda de Oliveira
Souza, Elen Mello de
Bonamino, Martin Hernan
Paula, Vanessa Salete de
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
INCA: Instituto Nacional de Câncer,Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
INCA: Instituto Nacional de Cancer. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Bras
Abstract
HSV-1 affects approximately 67% of the world population. Here, we sought to use the CRISPR / Cas9 system with the UL39 target, essential for virus replication. The sgRNA sequence was inserted into plasmid (PX459-UL39). Vero cells were transfected with PX459-UL39, and inhibition of viral replication was assessed 24 and 48 hours later using plaque assays and fluorescence and qPCR. Fluorescence analyzes revealed the presence of anti-HSV-1 CRISPR/Cas9 within Vero cells, and qPCR showed that the viral load decreased by> 95% of cells transfected with anti-HSV-1 CRISPR / Cas9. Our data demonstrate the usefulness of the PX459-UL39 to inhibit HSV-1 infection.
Keywords in Portuguese
HSV-1
sgRNA
Fluorescence
CRISPR/Cas9
 
Keywords
CRISPR
Cas-9 Vector System:
Targets UL-39
Inhibits HSV-1 Replication in Vitro
 
Publisher
Research Square
Citation
RAPOSO, Jéssica Vasques et al. CRISPR / Cas-9 Vector System: Targets UL-39 and Inhibits HSV-1 Replication in Vitro. Research Square, p. 1 - 10, Oct. 2021.
Notes
Resumo em português - Google tradutor: O HSV-1 afeta aproximadamente 67% da população mundial. Aqui, buscamos utilizar o CRISPR/Cas9 sistema com o alvo UL39, essencial para a replicação do vírus. A sequência de sgRNA foi inserida em plasmídeo (PX459-UL39). As células Vero foram transfectadas com PX459-UL39 e a inibição da replicação viral foi avaliada 24 e 48 horas depois usando ensaios de placa e fluorescência e qPCR. Fluorescência análises revelaram a presença de CRISPR/Cas9 anti-HSV-1 dentro das células Vero, e qPCR mostrou que o a carga viral diminuiu em> 95% das células transfectadas com anti-HSV-1 CRISPR/Cas9. Nossos dados demonstram a utilidade do PX459-UL39 para inibir a infecção por HSV-1.