Caracterização da imunidade celular durante a infecção humana pelo vírus amarílico

Abstract

A febre amarela (FA) é uma doença viral febril hemorrágica, infecciosa, de grande importância para a saúde pública, em função da sua gravidade clínica e potencial elevado de disseminação em áreas urbanas. De julho/2016 até junho/2018, Minas Gerais enfrentou o maior surto de FA com mais de 1.000 casos e 340 óbitos confirmados pela doença. Até o momento, são escassos os estudos que abordam a imunidade humoral e celular durante a infeçcão humana pelo vírus amarílico. Frente ao contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a imunidade celular e humoral de indivíduos infectados pelo vírus amarílico. A imunidade celular foi avaliada pela quantificação de quimiocinas, citocinas e fatores de crescimento sistêmicos séricos por ensaio Multiplex e pelo cultivo in vitro antígeno-específico de longa duração de células mononucleares do sangue periférico. Constam como grupos de estudo pacientes com FA nas fases aguda (dia 1 ao dia 15 após o início dos sintomas: D1-15) e convalescente (D16-315) para ambas as abordagens; e casos suspeitos de eventos adversos pós-vacinação contra FA (YEL-EAFI) para a avaliação por ensaio Multiplex. As análises evidenciaram que a infecção pelo vírus da febre amarela (VFA) selvagem não induziu uma imunidade celular com perfil protetor. A população celular CD4+ de memória central, apesar de não estar associada à proteção, foi um importante fator para não evolução de óbito e hepatite tardia. As análises dos fatores solúveis evidenciaram uma tempestade maciça de mediadores solúveis na FA aguda. Níveis superiores destes mediadores foram observados em pacientes com FA com maiores escores de morbidade, pacientes em terapia intensiva e aqueles que evoluíram para óbito. Por outro lado, níveis mais baixos foram observados em pacientes com FA que evoluíram para hepatite tardia (Hep-tardia). Um pico unimodal de biomarcadores em torno de D4-6 com diminuição progressiva em direção ao D181-315 foi observado em pacientes sem Hep-tardia, enquanto um padrão bimodal com um segundo pico em torno de D61-90 foi associado à Hep-tardia. Os pacientes que evoluíram para alta hospitalar apresentaram diminuição contínua dos biomarcadores e uma rede compacta/integrada, enquanto os que evoluíram para óbito apresentaram perfil estável/aumentado e uma rede segregada. CXCL10 previu FA aguda em comparação com controles com alta precisão (97%); CCL4 identificou pacientes que evoluem para alta hospitalar com acurácia moderada (86%); na doença aguda, altos níveis de IFN- preveniram a Hep-tardia (92%); na fase de convalescença, altos níveis de CXCL8 identificaram Hep-tardia (91%). Somam-se a estas evidências, os achados de positividade para o antígeno NS5 no fígado de pacientes com Hep-tardia, sugerindo persistência viral, mesmo após 60-90 dias após o início dos sintomas. Na análise dos dados de casos de YEL-EAFI, os biomarcadores séricos CCL3, CCL5, IL-15 e IL-1Ra discriminam YEL-EAFI confirmado de casos com outras doenças, seguido por VEGF para discriminar a infecção por VFA do tipo selvagem de casos com outras doenças que não sejam FA com alta precisão geral (91%). Este estudo forneceu um panorama abrangente de evidências de que respostas imunes distintas conduzem a patogênese e progressão da doença na infecção amarílica selvagem e o desenvolvimento de eventos adversos após a vacinação contra a febre amarela.