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Title: Monoclonal antibodies against an outer membrane protein from pathogenic Leptospira
Authors: Lüdtke, Charli Beatriz
Coutinho, Mariana Loner
Jouglard, Sandra Denise Dorneles
Moreira, Cecília Nunes
Fernandes, Cláudia Hartleben Pinho
Brod, Claudiomar Soares
Haake, David A.
Ko, Albert Icksang
Dellagostin, Odir Antonio
Aleixo, José Antonio Guimarães
Affilliation: Universidade Federal de Pelotas. Centro de Biotecnologia. Pelotas, RS, Brasil.
Universidade Federal de Pelotas. Centro de Biotecnologia. Pelotas, RS, Brasil.
Universidade Federal de Pelotas. Centro de Biotecnologia. Pelotas, RS, Brasil.
Universidade Federal de Pelotas. Centro de Biotecnologia. Pelotas, RS, Brasil.
Universidade Federal de Pelotas. Centro de Biotecnologia. Pelotas, RS, Brasil.
Universidade Federal de Pelotas. Centro de Controle de Zoonoses. Pelotas, RS, Brasil.
UCLA School of Medicine. Division of Infectious Diseases, Veterans Affairs Greater Los Angeles Healthcare System. Los Angeles, CA, USA.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Weill Medical College of Cornell University. Division of International Medicine and Infectious Diseases. New York, NY, USA.
Universidade Federal de Pelotas. Centro de Biotecnologia. Pelotas, RS, Brasil.
Universidade Federal de Pelotas. Centro de Biotecnologia. Pelotas, RS, Brasil.
Abstract: Foram obtidos dois hibridomas secretores de anticorpos monoclonais (MAbs) que reagem com uma lipoproteína (LipL32) da membrana externa de leptospiras patogênicas. Para a produção dos hibridomas, células do baço de camundongos BALB/c, imunizados com LipL32 recombinante (rLipL32), foram fusionadas com células SP2/O-Ag14, selecionadas em meio HAT e testadas em ELISA indireto. Um dos MAbs secretados pelos hibridomas é do isotipo IgG2b e o outro do isotipo IgM. A especificidade dos MAbs foi confirmada em ELISA indireto e immunoblotting usando rLipL32 purificada, Escherichia coli (E. coli) expressando LipL32 e sorovares patogênicos e saprófitas. Os dois MAbs reagiram com a maioria dos sorovares patogênicos e não reagiram com sorovares saprófitas. Os MAbs possuem potencial para uso em testes de diagnóstico de leptospirose.
Abstract: Two hybridomas secreting monoclonal antibodies (MAbs) that react with a lipoprotein (LipL32) of the outermembrane of pathogenic Leptospira were obtained. For hybridoma production, spleen cells from BALB/cmice imunized with recombinant LipL32 (rLipL32) were fused to SP2/O-Ag14 cells, selected in HAT mediumand screened in an indirect ELISA. One MAb produced was of the IgG2b isotype and the other was an IgM.MAbs specificity was confirmed by indirect ELISA and immunoblotting using purified rLipL32 and whole-cellantigen preparations from Escherichia coli (E. coli) expressing LipL32 and from pathogenic and non-pathogenic serovars. Both Mabs reacted with most of the pathogenic serovars tested and none reacted withnon-pathogenic Leptospira. The MAbs described have potential for use in diagnostic tests for leptospirosis.
Keywords: Leptospirosis
Monoclonal antibodies
LipL32
Issue Date: 2003
Citation: LÜDTKE, C. B. et al. Monoclonal antibodies against an outer membrane protein from pathogenic Leptospira. Brazilian Journal of Microbiology, v. 34, supl.1 p. 1-4, Nov. 2003.
ISSN: 1517-8382
Copyright: open access
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