Análise do perfil de expressão gênica em Leishmania mexicana mediante a deleção de genes codificantes de proteínas envolvidas em modificações químicas m1A e m5C em mRNAs

Abstract

Os Diferentes homólogos das proteínas responsáveis por catalisar as modificações químicas m1A e m5C em mRNAs foram identificadas em espécies de tripanosomatídeos, entretanto seu papel é desconhecido nestes protozoários. Assim, com o intuito de entender o papel dessas proteínas nesses parasitos, o presente estudo teve por objetivo principal analisar o perfil global de expressão gênica em Leishmania mexicana após o nocaute gênico das proteínas TRMT61A (associada à modificação m1A) e a proteína NSUN2 (associada à modificação m5C). Desta maneira, o trabalho teve início com a obtenção de linhagens de Leishmania mexicana contendo deleção dos genes de interesse. O nocaute de uma cópia gênica do TRMT61A indicou resultados de enriquecimento significativos de mRNAs relacionados à iniciação da tradução, como os codificantes de proteínas do complexo eIF3. Esse resultado sugere, preliminarmente, que a diminuição da modificação m1A causada pelo nocaute parcial da TRMT61A gerou uma compensação na expressão das proteínas na maquinaria de tradução para manter os níveis de tradução do transcriptoma geral. O nocaute em NSUN2 mostrou impacto em mRNAs de adenosina kinase, indicando que a diminuição de m5C causa efeito em aspectos que diz respeito ao metabolismo de purinas. A caracterização funcional dessas proteínas que modificam mRNAs em tripanosomatídeos é fundamental para compreensão dos mecanismos de regulação da expressão gênica nestes protozoários e, de forma adicional, podem contribuir no desenvolvimento de estratégias de controle utilizando alvos moleculares específicos.