Estudo de isolados sequenciais de Sporothrix spp. obtidos de pacientes com esporotricose disseminada de evolução crônica e síndrome da imunodeficiência adquirida

Abstract

Esporotricose é uma micose subcutânea que afeta humanos e outros mamíferos, causada por fungos do gênero Sporothrix. Em indivíduos imunocomprometidos, principalmente com síndrome da imunodeficiência adquirida (aids), pode ser fatal. Já foi demonstrado que Sporothrix brasiliensis, principal espécie causadora de esporotricose no estado do Rio de Janeiro, é capaz de aumentar sua virulência in vivo. Entretanto, não se sabe com que frequência esse evento ocorre em pacientes com formas crônicas e refratárias de esporotricose. Também há poucos dados sobre como as concentrações inibitórias mínimas (CIM) de antifúngicos frente a isolados de S. brasiliensis em pacientes com esporotricose refratária se comportam ao longo do tratamento. Desta forma, o objetivo desse estudo foi comparar isolados sequenciais de Sporothrix spp., a fim de detectar possíveis aumentos de virulência e aquisição de resistência a antifúngicos durante o curso crônico da doença, bem como correlacionar tais achados com dados clínicos dos pacientes. Este foi um estudo descritivo, com amostra de conveniência composta de pacientes com esporotricose e aids, da coorte do Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Os isolados foram identificados por reação em cadeia da polimerase utilizando iniciadores específicos de cada espécie. O crescimento dos isolados foi avaliado frente a fontes alternativas de carbono e comparado com o crescimento na presença de glicose. A suscetibilidade aos fármacos anfotericina B, itraconazol, posaconazol e terbinafina foi avaliada nas formas filamentosa e leveduriforme do fungo, seguindo protocolo preconizado pelo Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI). Pesquisaram-se possíveis fatores de virulência fúngica: termotolerância, resistência ao estresse nitrosativo e oxidativo, produção de urease, fitase, aspártico-protease, hemolisinas e lipases. Foram incluídos cinco pacientes, dos quais foram isolados e analisados 16 isolados de Sporothrix spp. Todos os pacientes apresentaram aids avançada, com complicações relacionadas à esporotricose disseminada e a outras doenças oportunistas. Todos os isolados foram identificados como S. brasiliensis e tiveram um bom crescimento em glicose e N-acetil-D-glucosamina, mas não em lactato. Quanto à suscetibilidade antifúngica, todos os isolados de dois dos pacientes estudados eram do tipo não selvagem para terbinafina, entretanto foram considerados tipo selvagem para os demais antifúngicos testados. Não houve variação significativa entre as CIM nas duas morfologias, mas estas aumentaram ao longo do curso da doença em alguns isolados de pacientes tratados com anfotericina B. A termotolerância dos isolados foi considerada de moderada a alta e, embora não significativo, isolados de sítios corporais profundos apresentaram maior termotolerância. Todos os isolados foram capazes de produzir enzimas relacionadas à virulência, exceto fitase e fosfolipase, sendo a esterase mais produzida por isolados obtidos de lesões cutâneas. Em alguns pacientes foram observadas alterações em todos os fenótipos estudados durante o curso da doença. Não houve associação estatística dos fenótipos estudados com aspectos clínicos dos pacientes. Os resultados mostram que os fenótipos de S. brasiliensis podem impactar na evolução da esporotricose crônica, mas não em todos os pacientes. O status imunológico do hospedeiro parece ter papel preponderante no desfecho clínico