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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/62727
IDENTIFICAÇÃO DE BACTÉRIAS CULTIVÁVEIS ISOLADAS DE ANOPHELES DARLINGI E ANOPHELES TRIANNULATUS, UMA ESPÉCIE SUSCETÍVEL E MENOS SUSCETÍVEL AO PLASMODIUM SPP.
Batista, Anny Caroline Araújo | Date Issued:
2024
Advisor
Co-advisor
Comittee Member
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Leônidas & Maria Deane. Manaus, AM, Brasil.
Abstract in Portuguese
A capacidade e a competência vetorial são elementos importantes, quando é levado em consideração que algumas espécies de mosquitos possuem um papel importante na transmissão da malária, enquanto outras possuem um papel menor, ou até mesmo não definido. Na região Amazônica o Anopheles darlingi é uma espécie altamente suscetível e considerada a principal espécie vetora de Plasmodium spp. An. triannulatus tem apresentado uma menor suscetibilidade e seu papel na transmissão da malária na região amazônica ainda não foi elucidado. Dentre os fatores que podem influenciar na suscetibilidade de um mosquito a determinado patógeno, destaca-se a microbiota, que tem sido alvo de muitos estudos atualmente. Estudos demonstraram que alguns gêneros de bactérias também possuem um papel importante na fisiologia e no desenvolvimento dos mosquitos Anopheles sp. Portanto, conhecer e identificar as bactérias presente na microbiota bacteriana de mosquitos menos suscetíveis e suscetíveis à infecção por Plasmodium spp., pode contribuir para o melhor entendimento acerca das interações entre esses organismos. Este trabalho teve como objetivo, analisar a composição da microbiota bacteriana de An. darlingi e An. triannulatus coletados em campo. Para isto, foram dissecados o intestino de mosquitos An. darlingi coletados em Coari, e de An. triannulatus coletados no bairro do Tarumã, da cidade de Manaus. Estes intestinos foram cultivados em três meios de cultivo: Ágar nutriente, Luria Bertani e ISP2. As bactérias obtidas foram caracterizadas morfologicamente e subdividas em grupos. Para amplificação e sequenciamento do gene rRNA 16, foram selecionados apenas os representantes de cada grupo. Foram sequenciadas 38 linhagens bacterianas sendo 21 de An. darlingi e 17 de An. triannulatus. Em An. darlingi, foram identificados 9 gêneros sendo o gênero Stenotrophomonas sp. o mais abundante, e duas espécies identificadas sendo elas: Providencia huaxiensis, e Lelliottia steviae, ambas as espécies ainda não haviam sido relatadas em mosquitos Anopheles sp. Em An. triannulatus, foram identificados cinco gêneros Bacillus sp. o mais predominante, e uma espécie identificada como Serratia surfactantfaciens. Neste trabalho foi possível realizar a identificação de bactérias que já são frequentemente encontradas na microbiota bacteriana dos mosquitos, como também novos táxons, que ainda não haviam sido relatados em ambas as espécies. A obtenção de bactérias cultiváveis confere a possibilidade de realização de estudos para avaliação da influência dessas espécies na fisiologia, e na suscetibilidade dos mosquitos, o que pode possibilitar o melhor entendimento acerca das interações que ocorrem nos mosquitos vetores.
Abstract
Vector capacity and competence are important factors to consider, given that some mosquito species play a significant role in malaria transmission, while others play a lesser or even undefined role. In the Amazon region, Anopheles darlingi is highly susceptible and is considered the main vector species of Plasmodium spp. Conversely, An. triannulatus has shown less susceptibility, and its role in malaria transmission in the Amazon region has not yet been elucidated. Among the factors that can influence a mosquito's susceptibility to a given pathogen is its microbiota, which has been the subject of many studies. Research has shown that certain genera of bacteria also play a crucial role in the physiology and development of Anopheles spp. mosquitoes. Therefore, identifying and understanding the bacteria present in the bacterial microbiota of mosquitoes that are less susceptible and more susceptible to infection by Plasmodium spp. can contribute to a better understanding of the interactions between these
organisms. The aim of this study was to analyze the composition of the bacterial microbiota of An. darlingi and An. triannulatus collected in the field. For this purpose, the intestines of An. darlingi mosquitoes collected in Coari and An. triannulatus mosquitoes collected in the Tarumã neighborhood of Manaus were dissected. These intestines were cultured on three media: nutrient agar, Luria Bertani, and ISP2. The bacteria obtained were morphologically characterized and subdivided into groups. Only one representative from each group was selected for amplification and sequencing of the 16S rRNA gene. A total of 38 bacterial strains were sequenced, 21 from An. darlingi and 17 from An. triannulatus. In An. darlingi, nine genera were identified, with the genus Stenotrophomonas sp. being the most abundant. Two species were identified: Providencia huaxiensis and Lelliottia steviae, both of which had not yet been reported in Anopheles spp. mosquitoes. In An. triannulatus, five genera were identified, with Bacillus sp. being the most predominant. One species was identified as Serratia surfactantfaciens. This study identified bacteria commonly found in the bacterial microbiota of mosquitoes, as well as new taxa not previously reported in both species. Obtaining cultivable bacteria enables further studies to assess the influence of these species on the physiology and susceptibility of mosquitoes, leading to a better understanding of the interactions in mosquito vectors.
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