Caracterização de cultura de Plasmodium spp. para uso no controle de qualidade do KIT NAT PLUS - BIO-MANGUINHOS

Abstract

A malária é uma doença causada pelo protozoário da classe Sporozoa, família Plasmodiidae, gênero Plasmodium e espécies Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax e Plasmodium malarie. Outras espécies podem causar malária humana como Plasmodium ovale e Plasmodium knowlesi, porém estas não foram identificadas no Brasil. Em indivíduos com quadro febril a esclarecer e história de deslocamento para regiões endêmicas ou entrada em região de Mata Atlântica deve-se investigar a associação ao quadro de malária por transmissão natural. Em caso de hemotransfusão, transplante de órgãos ou acidentes com material perfurocortante deve se considerar uma possível transmissão da doença. O diagnóstico padrão da doença é realizado pela visualização microscópica do protozoário do gênero Plasmodium em exame da gota espessa de sangue, corada pela técnica de Giemsa ou de Walker, e em distensão sanguínea, que permite a identificação da espécie, mas apresenta menor sensibilidade. Com o desenvolvimento da tecnologia de amplificação do DNA dos plasmódios usando a reação em cadeia da polimerase (PCR), o diagnóstico da malária baseado na detecção de ácido nucleico mostrou grande progresso em termos de eficácia. Nos últimos anos vem sendo desenvolvidos kits para diagnóstico molecular visando atendimento a uma demanda solicitada pelo Ministério da Saúde para ser aplicada na testagem de sangue a ser doado. Segundo a RDC 16/13, cada fabricante detentor de uma autorização de fabricação deve possuir um departamento de controle de qualidade (CQ). As atribuições do CQ se resumem em estabelecer, validar e implementar todos os procedimentos para garantia da qualidade, assim como avaliar, manter e armazenar os padrões de referência, garantir a rotulagem correta dos reagentes, padrões e outros materiais de sua utilização, garantir que a estabilidade dos ingredientes ativos e medicamentos seja monitorada, participar da investigação de reclamações relativas à qualidade do produto e participar do monitoramento ambiental. Todas essas operações devem ser realizadas em conformidade com procedimentos estabelecidos e registrados, mantendo assim a rastreabilidade das atividades. Para as análises de CQ, são necessárias que as amostras sejam padronizadas e sejam utilizadas como referência, visto que tem que se ter algo para comparar com o resultado obtido na análise, evitando assim viés nessa análise. Sendo assim, se faz necessária a padronização das amostras a serem utilizadas como padrões de referência nas análises de CQ de kits para diagnóstico afim de atender as normas de boas práticas de fabricação requisitadas pela ANVISA. Para a elaboração de painel de amostra, foi utilizada cultura do parasita, que foi avaliada e padronizada afim de gerar reprodutibilidade e linearidade nos lotes analisados e liberados pelo LACORE