Estudo do desenvolvimento e impacto da doença hepática gordurosa não alcóolica (DGHNA) na infecção pelo HIV: novos biomarcadores, microbiota intestinal e vias funcionais para diagnóstico e avaliação da patogênese na presença de esteatose e fibrose hepática

Abstract

Introdução: A doença hepática gordurosa não alcóolica (DHGNA) é caracterizada pelo acúmulo anormal de gordura no parênquima hepático. Trata-se de uma das principais causas de doença hepática crônica em todo o mundo e um problema de saúde em pessoas vivendo com HIV/AIDS (PVHA). Estratégias não invasivas como alternativa à biópsia hepática são necessárias para a diagnóstico precoce e manejo da DHGNA, principalmente em países em desenvolvimento. A validação do desempenho diagnóstico de modelos preditivos para DHGNA e fibrose avançada que utilizam parâmetros simples, como exames de sangue e medidas antropométricas, podem auxiliar no diagnóstico precoce e manejo da DHGNA em PVHA. Além da validação de métodos alternativos de diagnóstico, torna-se necessária melhor compreensão da DHGNA e o papel da microbiota intestinal no desenvolvimento de esteatose e/ou fibrose hepática na infecção pelo HIV. Objetivos: Validar o valor diagnóstico de modelos preditivos para detecção de DHGNA e/ou fibrose avançada em PVHA; caracterizar a microbiota intestinal de participantes mono-infectados pelo HIV e avaliar sua relação com presença de esteatose ou fibrose hepática em participantes do estudo PROSPEC-HIV (NCT02542020). Primeiro manuscrito: Este estudo teve como objetivo primário validar o desempenho diagnóstico de modelos preditivos não invasivos para detecção de DHGNA e fibrose avançada (METAVIR-F3F4) em 437 participantes mono-infectados pelo HIV. Foram realizadas avaliações clínicas, análises de biomarcadores séricos e aferição da rigidez hepática (liver stiffness measurement, LSM)/atenuação dos feixes ultrassonográficos (Controlled Attenuation Parameter, CAP) por elastografia hepática transitória (EHT). Foram calculados modelos preditivos para DHGNA [Steato-ELSA, Fatty Liver Index (FLI), Hepatic Steatosis Index (HSI), NAFLD Liver Fat-Score (NAFLD-LFS)] e fibrose [FIB-4, APRI e NAFLD Fibrosis Score (NFS)]. Foram avaliadas a área sob as curvas ROC (AUROC), sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo (VPP), valor preditivo negativo (VPN) e razão de verossimilhança (RV). Os biomarcadores para esteatose apresentaram boa acurácia e aqueles para detecção de fibrose avançada apresentaram alta especificidade (> 95%) e VPN (90%). Segundo manuscrito: Este estudo teve como objetivo primário avaliar a relação entre microbiota intestinal e doença hepática em 82 participantes mono-infectados pelo HIV-1. Foram realizados sequenciamento metagenômico por shotgun do gene 16S rRNA e do genoma inteiro em swabs retais coletados de um subconjunto de participantes monoinfectados pelo HIV com esteatose hepática (n=30), fibrose hepática (n=22) e controles (n=30) baseados nos resultados da EHT. As diferenças bacterianas foram avaliadas usando regressão binomial negativa com zero inflacionado (ZINB) e modelagem de florestas aleatórias e foram identificados contribuintes taxonômicos de deslocamentos funcionais usando FishTaco. O estado de saúde do fígado justificou quatro por cento da variação geral (r2=0,04, p=0,003) na composição bacteriana. Na esteatose, a análise funcional revelou elevação na síntese de ácidos biliares primários e secundários codificados por aumento de Eubacterium rectale, Finegoldia magna e Faecalibacterium prausnitzii, bem como redução de Akkermansia muciniphila, Bacteroides fragilis e Bacteroides dorei. Além disso, a biossíntese de folato foi reduzida. Pessoas monoinfectadas pelo HIV com doença hepática possuem perfis microbianos distintos. Algumas das diferenças da microbiota intestinal observadas nesta coorte são semelhantes àqueles associados à DHGNA e fibrose avançada em populações não-infectadas pelo HIV. Conclusões: Modelos preditivos que usam parâmetros simples têm acurácia satisfatória tanto para detecção de DHGNA como para exclusão de fibrose hepática avançada. Esses modelos devem ser incorporados à rotina de tratamento clínico de PVHA como alternativas não invasivas à biópsia hepática para diagnóstico precoce de doenças hepáticas na infecção pelo HIV. Por meio da avaliação da microbiota intestinal, identificamos possíveis contribuições microbianas na alteração das vias funcionais de biossíntese de ácido biliar e folato que provavelmente contribuem para a patogênese da DHGNA. Os resultados desta tese reforçam a hipótese que a microbiota intestinal tem papel importante na patogênese da DHGNA em pacientes infectados pelo HIV. De modo geral, nossos resultados fornecem evidências para elaboração de futuras estratégias para aprimoramento do diagnóstico e manejo, além de conhecimentos adicionais sobre efeitos da alteração da microbiota intestinal na progressão da DHGNA.