Neuroinflamação e Síndrome Congênita do Zika: estudo da assinatura imune em líquido cefalorraquidiano (LCR) de crianças com microcefalia e da infecção de células neuronais e endoteliais vasculares in vitro

Abstract

A Síndrome Congênita do Zika (SCZ) parece estar relacionada à causa multifatorial. Apesar da função protetora, a neuroinflamação tem sido apontada como um dos processos chave para o desenvolvimento da SCZ, uma vez que a desregulação desta resposta está associada a efeitos deletérios graves no Sistema Nervoso Central (SNC). Este trabalho avaliou o perfil imune da infecção congênita por ZIKV em LCR de crianças com microcefalia versus controle, e em ensaios in vitro, pelo uso de células de linhagem neuronal (células SH-SY5Y) e endoteliais vasculares cerebrais (HBMECs). Foram observados aumentos significativos de IFNIα, CXCL-9/MIG e CXCL-10/IP-10 nas amostras de LCR do grupo microcefalia (n=51) versus controle (n=27). Corroborando com esses dados, o aumento da produção de citocinas pró-inflamatórias (IL-1β, IL-6 e IL-12p70) foram detectadas no sobrenadante de células SH-SY5Y infectadas por ZIKV. Além disso, ensaios de expressão gênica demonstraram que o ZIKV induz aumento dos transcritos de TLR3, IFNA1, IFNB1, MMP-1, -3 e -9, e reduz a expressão de MMP2. A inibição parcial da via de IFN potencializa os efeitos da infecção, ocasionando aumento no percentual de células apoptóticas, maior replicação viral, redução nos níveis de CXCL-8/IL-8, CXCL-10/IP-10, CCL2/MCP-1 e CCL-5/RANTES. A ativação da via MAPK p38 também foi observada. As HBMECs demonstraram suscetibilidade e permissividade à infecção ao ZIKV, o qual utiliza o citoesqueleto de actina para produção da nova progênie viral. Em consequência da infecção, estas células produzem TNF e diminuem a expressão de MMP-9. MMP 1, 2 e 3, ICAM-I e VCAM1, no entanto, não foram alterados pela infecção. Nossos achados contribuíram para a identificação de moléculas imunes essenciais à resposta inflamatória frente à infecção por ZIKV, as quais podem ser utilizadas como base para o estudo de estratégias terapêuticas e profiláticas que auxiliem no controle da resposta imune em grávidas e recém-nascidos.