Padronização da espectrometria de massa MALDI TOF MS para a identificação rápida de fungos leveduriformes a partir de hemoculturas positivas

Abstract

As infecções de corrente sanguínea causadas por fungos são de difícil diagnóstico e estão associadas à elevada morbidade e mortalidade constituindo um grave problema de saúde pública. A hemocultura é o padrão de referência para o diagnóstico. A espectrometria de massa por ionização e dessorção a laser assistida por matriz-tempo de voo (MALDI TOF - MS) é uma técnica promissora na identificação de microrganismos diretamente do caldo de hemocultura a partir da detecção de positividade, sendo possível conhecer o patógeno infeccioso em aproximadamente uma hora. O estudo teve como objetivo avaliar a aplicabilidade do protocolo de diagnóstico rápido por MALDI TOF-MS em infecções de corrente sanguínea por fungos leveduriformes. Um total de 232 hemoculturas foram avaliadas através de uma análise retrospectiva de banco de dados, oriundas de 95 pacientes ambulatoriais e hospitalares da Rede D’Or São Luiz entre os anos de 2012 e 2018. Alíquotas das hemoculturas foram submetidas à técnica do protocolo rápido, consistindo em processos de centrifugação e lavagem de sedimento, e em concomitância subcultivadas em meios de cultura. Para determinação da identificação, os espectros testes foram comparados às cepas de referência, gerando diferentes pontuações de escore. C. parapsilosis foi a espécie predominante no estudo. 38,7% dos isolados foram identificados com pontuações de escore ≥ 1.7 pelo protocolo rápido e 100 por cento pelo subcultivo O valor da mediana do escore foi de 1.6 para o protocolo rápido e 2.0 para o subcultivo. C. tropicalis obteve a maior proporção de acerto no protocolo rápido. No ano de 2016 foram observadas as maiores pontuações de escore para o protocolo rápido, com cerca de 70 por cento. Em conclusão, a análise retrospectiva da aplicação do protocolo rápido demonstrou a identificação direta do patógeno clínico em 38,7% dos casos de fungemia, sendo estes notificados em 40 minutos após a positividade da hemocultura. A vantagem da identificação precoce evidenciou a otimização do diagnóstico clínico em pelo menos 24 horas