Caracterização genotípica e distribuição espacial do Trypanosoma cruzi no Estado da Bahia

Abstract

Introdução: Trypanosoma cruzi é o agente etiológico da doença de Chagas, cujos os vetores são insetos triatomíneos. É uma doença de grande importância para a saúde pública que acomete cerca de seis a sete milhões de pessoas em todo o mundo. Possui uma população heterogênea classificada em Unidades Discretas de Tipagem, TCI-TCVI e TCVII ou TCbat. A determinação dos genótipos do T. cruzi é relevante para estabelecer correlação entre linhagens de T. cruzi, espécies de triatomíneos e distribuição geográfica, contribuindo para o entendimento do impacto na ecoepidemiologia e características da doença de Chagas. Objetivo(s): Verificar a associação entre os diferentes genótipos do T. cruzi e aspectos epidemiológicos no Estado da Bahia. Material e Métodos: As amostras de triatomíneos foram obtidas no período de 2013 e 2014, através de uma proposta de colaboração interinstitucional entre o Laboratório de Patologia e Biologia Molecular/Instituto Gonçalo Moniz/Fundação Oswaldo Cruz e a Secretaria de Saúde do Estado da Bahia através do Laboratório de Entomologia do Laboratório Central da Bahia. Dos triatomíneos coletados, 2.789 exemplares foram selecionados, correspondendo a 187 registros de coletas em 48 municípios. O DNA dos abdomêns dos triatomíneos foi extraído e purificado utilizando o protocolo do kit comercial DNAzol®. Para a validação da técnica, foram incluídas amostras de DNA do T. cruzi obtidas da Coleção de Trypanosoma de Mamíferos Silvestres, Domésticos e Vetores do Instituto Oswaldo Cruz/Fundação Oswaldo Cruz. Para detecção e genotipagem do T. cruzi foram realizadas três reações em cadeia da polimerase convencionais utilizando três genes diferentes: citocromo oxidase subunidade II, Miniexon e subunidade 24Sα do rDNA. Em todas as amplificações foram utilizados primers marcados com fluorocromos. Em seguida, os amplicons foram analisados por eletroforese capilar. Os eletroferogramas gerados foram analisados com ajuda do software GeneMarker®. Resultados e Conclusão: Foram extraídas amostras de DNA dos abdômens de 2.789 triatomíneos, sendo analisadas 947 (33,95%) amostras através da PCR simples para detecção do T. cruzi, utilizando o gene COII. Destas, 25 amostras tiveram resultado positivo para T. cruzi. Foram analisadas treze espécies de triatomíneos diferentes e triatomíneos coletados em onze municípios tiveram resultado positivo para T. cruzi.