Ocorrência de Coxiella burnetii, Borrelia burgdorferi, Rickéttsias, Toxoplasma gondii e Dirofilária immitis em cães soropositivos para Leishmania infantum: associação com carga parasitária, alterações clínicas e histológicas de L. infantum

Abstract

A leishmaniose visceral (LV) no Brasil é causada pela Leishmania infantum. Esta protozoose causa imunossupressão no hospedeiro e as coinfecções em cães com LV podem agravar a doença. Entretanto, ainda é pouco estudada a associação das coinfecções com carga parasitária, sinais clínicos e alterações histológicas ocasionadas por L. infantum. Portanto, os objetivos desse estudo são avaliar a ocorrência de Coxiella burnetii, Borrelia burgdorferi, rickéttsias, Toxoplasma gondii e Dirofilaria immitis em cães sorologicamente positivos para L. infantum, bem como comparar os sinais clínicos, alterações histológicas e a carga parasitária de L. infantum em cães coinfectados com a dos monoinfectados por L. infantum. Com essa finalidade, foi realizado um estudo retrospectivo e um estudo prospectivo em cães sorologicamente positivos para L. infantum. No estudo retrospectivo, foram estudadas amostras de soro, fragmentos de baço, pele e medula óssea emblocados em parafina e fragmentos de baço congelados de 34 cães. No estudo prospectivo, 66 cães foram submetidos ao exame clínico, coleta de soro, punção aspirativa de medula óssea, seguida da eutanásia e necropsia. Na necropsia, foram coletadas amostras teciduais de pele, baço, fígado, pulmão, válvula tricúspide e mitral, útero e glândula mamária. Essas amostras foram fixadas em formalina tamponada neutra a 10% para realização das técnicas de histopatologia e imuno histoquímica (IHQ) visando a avaliação das alterações histológicas e carga parasitária de L. infantum. Adicionalmente, foi coletado um fragmento de baço para congelamento. Amostras congeladas de baço foram submetidas à técnica de PCR quantitativa (qPCR) para avaliação de carga parasitária de L. infantum entre os cães coinfectados e monoinfectados por esse parasito. Ademais, foram comparados os sinais clínicos entre esses grupos Todas as amostras de soro foram examinadas para detecção de anticorpos anti – T. gondii, anti -Ehrlichia spp., anti Anaplasma spp., anti- B. burgdorferi e de antígenos de D. immitis. Para diagnóstico de C. burnetii, amostras de punção de medula óssea foram submetidas à PCR convencional. Coinfecções foram observadas em 73 cães (73%). Dentre esses, 53 (53%) eram positivos para T. gondii, 46 (46%) para Ehrlichia spp., 16 (16%) para Anaplasma spp., 1 (1%) para D. immitis, e 1(1%) para Dioctophyme renale. Nenhum animal foi positivo para B. burgdorferi ou C. burnetii. Sinais clínicos foram observados em 26 (96,3%) dos cães monoinfectados e em 65 (89,0%) dos cães coinfectados. Na qPCR, a mediana de carga parasitária de L. infantum foi de 7,218 (gEq/ng) nos cães monoinfectados e de 6,335 (gEq/ng) nos cães coifectados (p=0,563). A itensidade de células inflamatórias foi maior nos cães coinfectados comparada à encontrada nos cães monoinfectados nos seguintes tecidos: baço (p=0,031), pulmão (p=0,049) e glândula mamária (p=0,041). Na IHQ, a mediana da carga parasitária da pele dos cães foi de 2,4 nos monoinfectados e de 1,4 nos cães coinfectados (p=0,516). A frequência de parasitismo na IHQ do baço, pulmão e útero foi maior nos cães coinfectados (p > 0.05). A presença de coinfecção em cães infectados por L. infantum não agravaram os sinais clínicos, nem a carga parasitária deste parasito, entretanto, foi associada a alterações histológicas mais graves em alguns tecidos