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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/64899
O PAPEL DA APOPTOSE NA COMPETÊNCIA VETORIAL DE AEDES AEGYPTI E AEDES FLUVIATILIS INFECTADOS POR ARBOVÍRUS.
Delgado, Jéssica Lana Fernandes | Date Issued:
2024
Co-advisor
Comittee Member
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brazil.
Abstract in Portuguese
Atualmente existem diversos arbovírus de importância epidemiológica em circulação no Brasil. O principal vetor desses arbovírus é o Aedes aegypti, que se encontra amplamente distribuído em todo o Brasil, expondo toda a população as arboviroses. O Aedes fluviatilis é outra espécie amplamente distribuída, e um potencial vetor para os arbovírus Dengue (DENV), Zika (ZIKV) e Febre Amarela (YFV) (experimentalmente). Um tipo de resposta antiviral importante no sistema vírus-hospedeiro é a habilidade de células infectadas se autodestruírem por meio da apoptose. Existem muitos exemplos em que a apoptose têm se mostrado como um importante mecanismo de defesa contra infecções virais. A partir do exposto, nosso objetivo foi caracterizar e comparar as espécies A. aegypti e A. fluviatilis relacionando sua competência vetorial para ZIKV e caracterizar os níveis de apoptose no intestino médio dos mosquitos infectados em diferentes dias pós infecção. Para realizar a infecção experimental, foram utilizados mosquitos da colônia do insetário do Laboratório de Entomologia médica. Os mosquitos foram divididos em quatro grupos e alimentados apenas com sangue ou com sangue adicionado a cultura de ZIKV. Após o repasto sanguíneo, as fêmeas não ingurgitadas foram descartadas. Para análise de infecção, ensaio de caspase e ensaio de túnel, foram processados mosquitos inteiros, corpo e cabeça e foi feita dissecção dos intestinos 7 e 14 dias após infecção. O A. aegypti e A. fluviatilis, obtiveram taxa de infecção disseminada de 100%, porém taxas de infecção e competência vetorial de 70% e 10%, respectivamente. O ensaio de caspase, revelou altos níveis de atividade de caspase do A. fluviatilis infectado com ZIKV. A espécie demonstrou diferença nos níveis de atividade de caspase tanto quando comparado com A. fluviatilis alimentado com sangue, bem como quando comparado ao A. aegypti infectado. O A. aegypti por sua vez, não obteve diferença nos níveis de atividade de caspase quando comparado mosquito infectado e mosquito alimentado com sangue. Através do ensaio de túnel, foi observado que o A. fluviatilis apresentou mais atividade apoptótica nas células do intestino, corroborando para os resultados obtidos através do ensaio de caspase. Esses dados sugerem que a refratariedade a infecção pelo ZIKV, da espécie menos susceptível, pode ser influenciada pela apoptose.
Abstract
Currently, many arboviruses of epidemiologic importance, are circulating in Brazil, where Dengue Virus (DENV) is the most important. The Zika Virus (ZIKV) has arrived in Brazil in 2015 where many cases have been reported, concerning the Brazilian authorities. The main vector of these arboviruses is the Aedes aegypti mosquito, and the Aedes fluviatilis is a potential vector (Silva et al., 2017). Both species are wildly spread throughout South America, especially in Brazil, bringing risks and exposing the population to the viruses. An antiviral response to infection from the vector is the cellular self-destruction capacity through apoptosis. Some authors have shown that the vector competence of a mosquito species to a virus can be affected by significantly enhancing the number of cells in apoptosis after an infected blood meal. The aim of this work is to evaluate the effect of apoptosis in the midgut of the different mosquito species when infected with ZIKV. Female mosquitos of A. aegypti and A. fluviatilis were separated in four groups and fed with blood or blood infected with ZIKV. Females that didn’t feed were discarded. To analyze infection rate, caspase activity and perform tunnel assay, the females were processed and the midguts were dissected 7 and 14 days post infection (dpi). The A. aegypti and A. fluviatilis had a disseminated infection rate of 100%, however, a infection rate and vector competence rate of 70% and 10% respectively. In addition, during the caspase assay, the A. fluviatilis mosquitoes infected with ZIKV, exhibited high caspase activity. The specie showed higher caspase activity levels when comparing to the blood fed group and when comparing with the A. aegypti. The A. aegypti, in turn, didn´t show any differece when comparing blood fed mosquitoes and ZIKV infected mosquitoes. Through the tunnel assay, were observed that the A. fluviatilis showed more cells in apoptosis in the midgut, corroborating with the results obtained through the caspase assay. Thus, concluding that the apoptosis seems to influence in A. fluviatilis susceptibility for ZIKV. Also, the susceptibility of A. fluviatilis to infection is inversely proportional to apoptosis level and vector competence, indicating a low capacity of this vector to transmit ZIKV to population.
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