Análise da influência do antígeno Duffy receptor de Quimiocínas (DARC) na suscetibilidade à infecção por Plasmodium vivax.

Abstract

A infecção por Plasmodium vivax é uma das principais causas de malária fora da África, responsável por morbidade significativa estimada em 247 milhões de casos, pela OMS em 2021. Na infecção por P. vivax, os merozoítos reconhecem receptores de superfície nos reticulócitos, por meio da ligação da proteína de superfície do parasito, a PvDBP, ao receptor de antígeno Duffy para quimiocinas (DARC). Essa interação permite a invasão do parasito nos reticulócitos e o estabelecimento da infecção, o que faz desse receptor constante alvo de estudos. Apesar de ser a principal via de invasão, há relatos crescentes de infecção por P. vivax em indivíduos DARC negativos, ou seja, em indivíduos que não expressam o receptor DARC em seus eritrócitos. O locus Duffy (FY) está localizado no cromossomo 1 e é caracterizado por três alelos principais: dois alelos funcionais, FY*A e FY*B, e um alelo não funcional, FY*BES. Estudos demonstraram existirem diferenças entre os alelos funcionais FY*A e FY*B em relação à afinidade pela proteína de superfície do parasito, a PvDBP, caracterizada por uma ligação mais fraca para o alelo funcional FY*A quando comparado ao alelo FY*B. Assim, tanto o tipo quanto o nível de expressão do receptor DARC nos eritrócitos parecem influenciar a suscetibilidade à infecção por P. vivax. Já o alelo FY*BES é responsável pela ausência de expressão de DARC e, consequentemente, menor suscetibilidade à infecção por P. vivax. Para esclarecer a base genética da interação parasito-hospedeiro na malária, este estudo teve como objetivo principal avaliar como as variantes DARC modulam a suscetibilidade à malária em uma população exposta à infecção por P. vivax na Amazônia brasileira. Aqui, foram genotipados o locus onde se encontra o gene FY, por Real-Time PCR (qPCR), direcionado às principais regiões polimórficas desse gene, a região do promotor e a região do exon-2, utilizando ensaios comerciais baseados em sondas de hidrólise. A suscetibilidade à infecção foi avaliada por meio da análise da prevalência de malária clínica causada por P. vivax em dois anos (2018 a 2021) de acompanhamento da população do estudo. Iniciamos os estudos com uma coorte inicial de 2.300 indivíduos, do município de Mâncio Lima, na região do Vale do Juruá, Acre. Desse total foram genotipados com sucesso 1928 indivíduos, 84% dos indivíduos da coorte inicial. A população estudada apresenta frequências semelhantes para genótipos com apenas um alelo funcional, (16,18% para FY*A/ FY*BES, 15,92% para FY*B/ FY*BES) ou dois alelos funcionais (15,09% para FY*A/FY*A, 16,03% para FY*B/FY*B). A porcentagem de indivíduos DARC negativos é de 6%, um pouco maior quando comparado com os dados de populações de outras regiões do norte do Brasil (3-5%). A maioria dos indivíduos eram assintomáticos para malária no período do estudo, sendo a infecção por Plasmodium spp. detectada na maioria dos casos apenas por métodos diagnósticos moleculares, como a qPCR. Entre 3,5 a 4,3% dos indivíduos estavam infectados por P. vivax para cada grupo genotípico, com exceção dos DARC negativos. Neste, apenas um indivíduo DARC negativo foi observado com infecção por P. vivax, apresentando mais de um episódio ao longo dos quatro anos do estudo. Até o momento, nossos resultados sugerem que indivíduos DARC negativos, caracterizados pelo genótipo onde os alelos expressos são incapazes de serem traduzidos no receptor final, podem estar de fato protegidos da malária clínica por P. vivax. No entanto, para as outras variantes DARC não observamos nenhuma associação entre os polimorfismo DARC e a suscetibilidade à infecção por P. vivax. O presente estudo foi o maior estudo de caracterização genética do receptor DARC de uma população da Amazônia Brasileira. Os dados gerados vão permitir uma melhor compreensão da dinâmica de transmissão da malária na população de estudo. Além disso, o método aqui padronizado de qPCR permitirá a genotipagem de um número significativo de amostras provenientes de outras populações com tempo e quantidade de reagentes otimizados.