Avaliação do potencial antigênico das proteínas ribossomais L3 e L5 de Leishmania major nas leishmanioses humana e canina

Abstract

No Brasil, as leishmanioses são doenças negligenciadas, de caráter zoonótico, tendo o homem como hospedeiro acidental, e o cão como hospedeiro no ambiente doméstico e peridomiciliar, participando do ciclo de transmissão do parasito. As três principais espécies do parasito Leishmania, causadoras da Leishamniose Tegumentar (LT) são: L. braziliensis, L. amazonensis e L. guyanensis; em que, dependendo da interação da espécie do parasito com as células mononucleares do hospedeiro vertebrado, podem conduzir ao desenvolvimento de lesões cutâneas (únicas ou múltiplas) e lesões mucosas (acometendo a cartilagem nasofaringe). A Leishmaniose Visceral (LV), é causada pela L. infantum, que possui um tropismo para órgãos internos ricos em macrófagos, afetando, principalmente o fígado, baço e medula óssea. Os cães domésticos são os principais agentes da disseminação do parasito a partir de focos enzoóticos, contudo, esses animais que apresentam sintomatologia ou não, albergam os parasitos na derme. O Ministério da Saúde recomenda medidas de controle que incluem: o uso de inseticidas, diagnóstico, apreensão e eutanásia de cães infectados. No entanto, a execução desta prática tem se mostrado uma tarefa altamente traumática e gerando um grande desconforto social. Estudos indicam que a vacinação seria a ferramenta mais eficaz para o controle das leishmanioses Em vista disso, foram descritas proteínas ribossomais de L. major, LmL3 e LmL5, que foram capazes de induzir uma resposta protetora, mediada predominantemente por um perfil Th1 em infecção murina contra as espécies de LV e de LT. Diante disso, os principais objetivos deste trabalho foram: caracterizar a resposta celular e humoral, a fim de avaliar a antigenicidade das proteínas in vitro, em amostras de pacientes com LT e cães com LV, através da realização de ensaios por imunofenotipagem, dosagem de citocinas, e dosagem de imunoglobulinas. Foi possível observar que, as proteínas foram capazes de induzir uma resposta fraca e heterogênea de citocinas inflamatórias específicas de células TCD4+ e TCD8+, indicando que as proteínas não são bons alvos antigênicos. No entanto, foi observado altos níveis de IgG e IgG2 específicos para a proteína LmL5, nos grupos de cães assintomáticos e sintomáticos, e baixos níveis de IgG1 para ambos os grupos. Por outro lado, a proteína LmL3, foi reconhecida por altos níveis de IgG1 e IgG2 específicos somente no grupo de cães sintomáticos, sugerindo, então, que a LmL3 pode ser um biomarcador de gravidade da LV em cães. Em relação ao grupo de cães sadios, não foram detectados anticorpos específicos para as proteínas LmL3 e LmL5, demostrando que ambas possuem uma alta especificidade para cães com LV. Nossos resultados sugerem que as proteínas recombinantes, podem ser um bom alvo para compor um diagnóstico sorológico contra a LV em cães, pois foi possível distinguir amostras de cães sadios de cães com LV, como também, identificar a gravidade da LV em cães