Caracterização do envolvimento hepático, pulmonar, cardíaco e renal na infecção pelo vírus dengue sorotipo 4 em modelo murino e em casos humanos fatais

Abstract

Desde sua introdução no Brasil, o vírus dengue sorotipo 4 (DENV-4) permaneceu ausente do cenário epidemiológico nacional por quase 25 anos, até sua reintrodução em 2010. Apesar de casos de DENV-4 normalmente apresentarem sintomatologia mais branda, fatores como infecções secundárias por sorotipos heterólogos podem resultar em casos fatais. Estudos acerca da patogênese da dengue são dificultados, principalmente, pela inexistência de modelos animais experimentais que reproduzam adequadamente a infecção pelo vírus como observada em casos humanos. O presente estudo tem como objetivo caracterizar o perfil imuno-histopatológico e ultraestrutural do envolvimento hepático, pulmonar, cardíaco e renal em modelo murino e de casos humanos fatais infectados pelo DENV-4. Para tal, camundongos da linhagem BALB/c foram inoculados pela via intravenosa com cepa de DENV-4, isolada de caso humano de dengue, e o fígado, o pulmão, o coração e os rins foram coletados para a análise por microscopia de campo claro, microscopia eletrônica de transmissão, imuno-histoquímica e transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase. De forma semelhante, quatro casos humanos de óbito por DENV-4 ocorridos entre 2011 e 2013, no estado do Ceará, tiveram o perfil histopatológico das alterações analisado por microscopia de campo claro. Títulos elevados de RNA viral, variando entre 10-3 e 1010, foram observados no soro, fígado, pulmão e coração de camundongo BALB/c, com detecção de antígeno viral nos órgãos supracitados e no rim. Alterações encontradas no fígado, pulmão e rim de casos humanos e camundongos BALB/c foram semelhantes, e muitos desses achados apresentam um perfil análogo Em contrapartida, não foram observadas alterações em coração de casos humanos, ainda que estas estivessem presentes no modelo animal. O resultado positivo do qRT-PCR no soro desses animais demonstra que ocorreu a infecção pelo DENV-4 após a inoculação com cepa isolada de paciente humano não neuroadaptada. Além disso, a imuno-histoquímica sugere a replicação do vírus em hepatócitos, pneumócitos, cardiomiócitos e células endoteliais de camundongo. A detecção de viremia e a observação de um padrão das alterações histopatológicas observadas nos camundongos BALB/c, semelhantes ao que foi observado em casos humanos fatais de dengue, demonstra a susceptibilidade do modelo animal, e sugere a existência de um maior tropismo do vírus por tecido cardíaco murino