Avaliação e validação da proteína TPN17 para o imunodiagnóstcio da sífilis utilizando DAgS-ELISA

Abstract

Introdução: A sífilis é uma infecção sexualmente transmissível (IST) exclusiva dos seres humanos e causada pela bactéria Treponema pallidum. Possui elevada incidência, sendo um problema de saúde pública que afeta adultos, gestantes e recém-nascidos. O fluxo diagnóstico baseia-se em uma investigação inicial por um teste treponêmico, seguido por testes sequenciais utilizados com o objetivo de aumentar o valor preditivo positivo do teste inicial. Por isto, o diagnóstico da infecção é realizado através de testes sorológicos não treponêmicos (VDRL e RPR) e treponêmicos (ELISA, QML e IFI). Objetivo (s): Validar um ELISA sanduíche duplo antígeno (DAgS-ELISA) utilizando a TpN17, através de amostras séricas de indivíduos infectados e não infectados por T. pallidum. Material e Métodos: Oitocentas e vinte e cinco amostras foram consideradas elegíveis e recaracterizadas utilizando VDRL, ELISA e FTA-ABS. Destas, 625 foram incluídas na avaliação, sendo 180 T. pallidum-positivas, 169 T. pallidum-negativas e 264 positivas para outras doenças. A padronização foi realizada utilizando checkerboard titration. Os resultados foram avaliados através da área abaixo da curva ROC (AUC), sensibilidade, especificidade, acurácia e índice Kappa de Cohen (κ). Resultados e Conclusão: No estudo de fase I, a TpN17 apresentou excelente área abaixo da curva ROC (AUC) de 98,5%, especificidade de 100%, sensibilidade de 91,7%, devido a 9 (8,3%) amostras falso-negativas, e acurácia de 95,7%. O Kappa de Cohen foi de 0,91, alcançando uma concordância quase perfeita em relação ao padrãoouro. No estudo de fase II, a proteína apresentou elevados valores da AUC (> 98%) para a sífilis primária, secundária e latente recente. Para a sensibilidade, a TpN17 variou de 83,3% a 94,8% com o maior valor para a sífilis secundária. Todas as fases clínicas obtiveram uma especificidade de 100% e a TpN17 apresentou elevada acurácia diagnóstica (> 96,2%) para todos os estágios clínicos. Também no estudo de fase II, a molécula obteve uma concordância quase perfeita em relação ao padrão-ouro. Foi observada reatividade cruzada para sete amostras positivas para a doença de Chagas (11,5%), duas para HBV (2,6%), três para HCV (6,4%) e quatro para HTLV (6,8%). De acordo com os parâmetros diagnósticos avaliados, a proteína apresentara capacidade diagnóstica elevada independente do estágio clínico da doença.