Avaliação do papel de linfócitos T CD8+ durante estágio sanguíneo da infecção com Plasmodium yoelii

Abstract

Malária é uma doença infecciosa causada pelo protozoário do gênero Plasmodium. A transmissão da doença ocorre através da picada do mosquito Anopheles fêmea infectado. No Brasil, a principal espécie causadora de malária é P. vivax (89%), sendo responsável por cerca de 100 milhões de casos no mundo anualmente. P. vivax apresenta tropismo por eritrócitos imaturos (reticulócitos), e provoca infecção menos grave do que P. falciparum. No entanto, podem ocorrer complicações associadas à doença, tais como disfunções hepática e renal, malária cerebral, anemia grave e trombocitopenia. Assim como P. vivax, a cepa P. yoelii 17XNL (não letal) infecta preferencialmente reticulócitos em roedores, o que permite explorar eventos imunológicos desencadeados no baço e medula de camundongos experimentalmente infectados. O papel dos linfócitos T CD8+ citotóxicos (CTLs) no controle da infecção de estágio sanguíneo por Plasmodium é controverso e pouco investigado. Sendo assim, o presente trabalho tem como objetivo avaliar o papel dos linfócitos T CD8+ durante estágio sanguíneo da infecção com as cepas de P. yoelii letal (PyL) e não letal (PyNL). No estudo de comparação do curso da infecção experimental, observou-se que a cepa PyL infecta primariamente eritrócitos, ao passo que a infecção com PyNL apresentou, predominantemente, tropismo por reticulócitos. Foi possível observar também que ambas as cepas induzem eritropoiese extramedular, bem como níveis altos de expressão de MHC-I por reticulócitos infectados. Nos experimentos realizados para avaliar o papel do IFN-γ durante a infecção com PyNL, constatou-se que a expressão de MHC-I é induzida por IFN-γ, sendo possível observar que a transcrição de alguns genes essenciais para a expressão de MHC-I ocorre nos eritroblastos, enquanto a tradução e montagem do complexo pode ocorrer nos reticulócitos recentemente enucleados. Além disso, camundongos IFN-γ KO foram mais susceptíveis à infecção quando comparados a camundongos WT. A avaliação do perfil fenotípico e funcional de linfócitos T mostrou que ambas as cepas induzem ativação de linfócitos T, bem como a produção de níveis significativamente mais altos de IFN-γ e de granzima B por CTLs. Assim como os animais IFN-γ KO, camundongos β2 microglobulina KO (β2M KO) são mais susceptíveis à infecção, entretanto em menor proporção. Nos experimentos de reticulocitose induzida por fenilhidrazina, observou-se sobrevida prolongada de camundongos β2M KO infectados com PyL. Em conclusão, o presente estudo demonstrou consistentemente que CTLs contribuem pelo menos parcialmente para o controle da infecção de estágio sanguíneo com Plasmodium reticulotrópico por meio de mecanismo dependente de IFN-γ. Os resultados obtidos neste estudo poderão contribuir para melhor entendimento da infecção humana causada por P. vivax, o qual apresenta tropismo por reticulócitos.