Desenvolvimento de métodos diagnósticos por Dot-Blot para infecções de baixa carga de Schistosoma mansoni

Abstract

Introdução: A esquistossomose é um grave problema de saúde pública mundial. A Organização Mundial de Saúde (OMS) estima a eliminação da doença para 2021. Para atender essa estimativa é fundamental um método diagnóstico eficiente para o tratamento dos verdadeiros positivos. Para o diagnóstico, a OMS preconiza à realização de duas lâminas de Kato-Katz. Porém, no Brasil a infecção é caracterizada por indivíduos com baixa carga parasitária (< 99 ovos por grama de fezes) e o método de Kato-Katz, apesar de muito específico, vem apresentando falhas de sensibilidade para esses indivíduos. Por isso, é fundamental o desenvolvimento de métodos diagnósticos eficientes. Diante desse cenário, este trabalho desenvolveu dois métodos de diagnóstico baseados na detecção direta e indireta da infecção. Métodos: Proteínas recombinantes, CCAr e MEAr, foram produzidas respectivamente a partir do vetor recombinante e por metodologia Gateway®, seguido da produção de anticorpos anti-CCAr. Os novos métodos foram baseados na metodologia do Dot-Blot e avaliados com amostras de pacientes não endêmicos e endêmicos da região de Tabuas, Minas Gerais, acompanhados por nossa equipe. Resultados: Residentes de Tabuas foram acompanhados em 2017 onde identificou-se 9,3% de prevalência. Proteínas e anticorpos foram produzidos e aplicados no diagnóstico. Os novos métodos de diagnóstico foram padronizados utilizando suporte desenvolvido em impressora 3D. dDOT-CCA demonstrou sensibilidade de 66%, especificidade de 56% e acurácia de 62%, enquanto iDOT-MEAr obteve 75% de sensibilidade, 88% de especificidade com acurácia de 60%. Conclusões: Novos métodos mais específicos e sensíveis são necessários para determinação da real prevalência e intervenções de controle. Esse trabalho permitiu o desenvolvimento de testes de Dot-blot com uso da CCAr e MEAr que constitui uma importante e inovadora ferramenta para auxilio na eliminação da doença. Além disso, os novas testes poderão ser adaptados para dispensarem uso de equipamento e serem utilizados no campo.